Микробиология
выполнены студентками 3 курса
Климко Натальей
и Плаховой Анастасией
год
1. Микробиология - история развития, задачи и связь с другими науками. Роль микробов в народном хозяйстве и патологии животных (примеры)
Микробиология (от греч. micros-малый, bios-жизнь, logos-учение) - наука о мельчайших, не видимых невооруженным глазом организмах, названных микроорганизмами или микробами. Изучает строение, физиологию, биохимию, генетику и экологию микроорганизмов, их взаимоотношения с окружающей средой и значение в жизни человека, животных и всей биосферы.
История развития:- вторая половина XVIII - середина XIX вв. (Врач Гиппократ - заразные болезни вызывают невидимые организмы; в Древнем Вавилоне находили двояковыпуклые линзы; Левенгук создал микроскоп в 1683 году; Петр 1 посетил Левенгука и привез микроскоп в Россию)- пастеровский период второй половины XIX в. (Пастер положил начало м/б. Изучил различные виды брожения, открыл аэробы и анаэробы, ввел жидкие питательные среды, методы стерилизации и пастеризации)- первая половина XX в. (дальнейшее развитие микробиологии, становление вирусологии как науки)- современный период (ликвидация чумы, сапа, оспы, полиомиелита, сиб. язвы, бешенства, столбняка; проблемами остаются лейкозы, стафилококковая инфекция, сальмонеллезы, бруцеллезы, туберкулез, лептоспироз)
Задачи:
*дальнейшее изучение роли отдельных видов пат. микроорганизмов в этиологии и патогенезе различных заболеваний
*изучение механизмов формирования врожденного и приобретенного иммунитета
*микробиологический синтез новых продуктов
*влияние факторов среды на жизнедеятельность микроорганизмов
*разработка методов лечения и профилактики инфекционных заболеваний
Микробиологические методы исследования применяют в ряде смежных дисциплин: эпизоотологии, ветеринарно-санитарной экспертизе, акушерстве, хирургии, фармакологии и др.
Роль микробов в народном хозяйстве и патологии животных:
*они участвуют в круговороте веществ в природе, в особенности углерода
*участвуют в образовании полезных ископаемых, а также в их добычи
*вызывают заболевания человека, животных и растений
*вызывают порчу пищевых продуктов, строительных материалов, коррозию металлов
*с их помощью получают белки, жиры, углеводы, органические кислоты, ферменты, витамины, антибиотики и другие ценные вещества
*с их помощью получают хлеб и хлебопродукты, квас, вино, пиво, различные молочные продукты, колбасы и т.д.
*широко используется в сельском хозяйстве для получения высоких урожаев сельхоз культур и животноводстве
2. Строение микробной клетки и химический состав
Основные структуры: клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма с рибосомами, геном или нуклеотид (ДНК). Временные структуры - капсула, жгутики, ворсинки, эндоспора.
Клеточная стенка из пептидогликана (муреина) - защищает, определяет форму, участвует в метаболизме, несет поверхностные АГ, рецепторы, у патогенных токсична. Окрашивается по Грамму: антибиотики, УФЛ, хим. вещества могут привести к частичному (сферопласты Гр- красные) или полному (протопласты Гр+ фиолетовые). Они в 3-10 раз крупнее, быстро погибают или трансформируются в L-формы - мутанты бактерий, полностью или частично не способные синтезировать муреин, полиморфны, не чувствительны к а/б, проникают через плаценту, часто меняют патогенные свойства, фильтруются через бактериальные фильтры, могут быть стабильными и нестабильными (способны превращаться в исходные клетки), участвуют в развитии хронических инфекций.
ЦПМ (плазмолемма) - полупрон. липопротеидная структура, бак.клеток, является барьером через который идет метаболизм, без неё клетка гибнет., в ней содержатся ферменты-пармеазы, которые участвуют в обмене веществ, при инвагинации образуются мезосомы, которые участвуют в дыхании и делении бактерий.
Цитоплазма - состоит из цитозоля (гомогенной фракции: РНК, ферменты, продукты метаболизма, питательные вещества) и структурных элементов (рибосомы - основная масса, участвуют в синтезе белка; мезосомы; включения - липиды, полифосфаты, полисахариды, волютин; нуклеоид - ядро прокариот, замкнутая в кольцо двухспиральная нить ДНК, без ядерной оболочки).
Плазмиды или эписомы (внехромосомные генетические элементы) - двухцепочные ДНК замкнутые в кольцо, обеспечивают устойчивость к антибиотикам и патогенные свойства.
Капсула - слиз. слой из гомо- и гетерополисах-ов, реже из полипептида, над клеточной стенкой. Микро-, макрокапсулы. Содержат капсульный АГ, защита от механ. повреж-й, высыхания, токсинов, фагоцитоза АТ. Явл. фактором вирулентности. Образуют капсулу только в организме животных или на кровяных средах.
Жгутики - органоиды движения из сократ-го белка. Содержат жгут-ый Аг (Н-Аг)
Пили (ворсинки) - трубочки из белка пилина, не явл-я орган-ми движения. Половые пили - уч. в половых проц-х; пили общего типа - адгезия к субстрату.
Спора - состояние покоящихся клеток, хар-ся резко сниженным уровнем метаболизма и высокой резистентностью. Формируется внутри материнской клетки, имеет в своем составе дипеклиновую кислоты, на размножение влияют влажность, pH среды.
. Характеристика плесеней и дрожжей. Аспергиллез и кандидомикоз
Плесневые грибы, или плесени, как их принято называть, распространены повсеместно. Они относятся к различным классам грибов. Все они являются гетеротрофами и, развиваясь на пищевых продуктах (фруктах, овощах и других материалах растительного или животного происхождения), вызывают их порчу. На поврежденной поверхности появляется пушистый налет, первоначально белого цвета. Это - мицелий гриба. Вскоре налет окрашивается в различные цвета от светлого до темного оттенков. Эта окраска образуется массой спор и помогает распознавать плесени. Из плесеней чаще всего встречаются Мuсоr (мукор), Penicillium (пенициллиум) и Aspergillus (аспергиллус).
Дрожжевые грибы, или дрожжи - одноклеточные, лишенные хлорофилла немицелиальные грибы (эукариоты), относящиеся к классу аскомицетов (сумчатые грибы). Дрожжи - высшие грибы, утратившие способность образовывать мицелий и превратившиеся в результате этого в одноклеточные организмы. Дрожжи активно размножаются в тех субстратах, где имеются доступные растворимые источники углерода, могут осуществлять спиртовое брожение и анаэробное дыхание. Могут быть различной формы (круглые, овальные, лимоновидные, стреловидные, цилиндрические, яйцевидные, грушевидные, треугольные, многоугольные, серповидные), некоторые образуют капсулы, имеют включения гликогена, волютина, жира в виде отдельных капель, либо одной липидной вакуоли. Размножение: вегетативное (почкование образуется псевдомицелий), бинарное деление (образуется истинный мицелий), почкующееся деление (отгорожены друг от друга септой)), половое размножение (слияние гаплоидных клеток, мейоз), размножение с помощью спор (не образуется аска, в клетке образуются аскоспоры).
Аспергиллез - острая или хроническая болезнь животных и птиц, характеризующаяся поражением органов дыхания, органов брюшной полости. Находят фибринозные мелкие узелки различной формы и цвета, содержащие гифы мицелия грибов из рода Aspergillus. Основной возбудитель - A.fumigatus. Снижение резистентности организма, ухудшение условий содержании и кормления способствуют заболеванию аспергиллезом. Имеется опорная клетка, от неё отходит конидиеносец, на котором образуется вздутие. От вздутия отходят стеригмы (цилиндрические клетки), фиалиды (вытянутые клетки), цепочки спор - конидии. Культивируют на агаре Сабуро (белые пушистые колонии меняющие после цвет на зеленый или желтый), среде Чапека (гладкие звездчатые зеленые или черные колонии).
Кандидомикоз - микозная болезнь животных и человека характеризуется поражением слизистых оболочек ЖКТ и других органов с образованием белых пленок наподобие творожистых наложений, а также гранулематозных образований во внутренних органах. Вызывается дрожжеподобными грибами из рода Candida, главным образом Candida albicans. Размножаются почкованием. Микроскопию проводят в препарате раздавленная капля. Окрашивают по Романовскому-Гимзе. Крупные овальные клетки, Гр+, имеется двухконтурная оболочка, не образуют аски. На сусло-агаре колонии из дрожжевых клеток, вросших в субстрат. На жидкой среде помутнение, осадок, пленки, пристеночное кольцо. Продуцирует токсины - кандидатоксин и гликопротсин. Биопроба на цыплятах, кроликах, мышах для дифференциации.
. Микрофлора тела животных и её физиологическое значение
Некоторые микроорганизмы являются постоянными обитателями организма животных. Другие временные - поступают с водой, кормом, воздухом.
М/ф кожи. Пост-ые: стафилококки, стрептококки, актиномицеты, сарцины, киш-ая и синегнойн. палочки. Зависит от условий содержания.
М/ф дых. путей. У новорожд. нет. Стрептококки, стафилококки, актиномицеты, микоплазмы, плесн. и дрож. грибы.
М/ф желудка. Бедна из-за желудочного сока и кислой среды. Сарцины, молочнокислые бак, актиномицеты, энтерококки.
М/ф рубца. Более богата из-за эпифитной и почвенной м/ф. Происх. сложные биохим. и микробиол. процессы с участием целлюлозораз-их бактерий. Гнилостные бактерии и возб-ли брожений.
М/ф тонкого. Более бедна. Энтерококки, ацидофильные, споровые микробы. актином., кишечная палочка.
М/ф толстого. Наиболее богатая. Энтерококки, стаф, стрепт, дрожжи, плесени, актином, гнилостные м/о. У перебол-их в фекалиях встреч. патоген. м/о, которые могут заражать здоровых (реконвалесценты).
М/ф мочеполов. органов. У здоровых только на наружных участках. стаф, стреп, микрококки, микобактерии..
Роль м/ф: формирование иммун.активности, антогонизм патогенной м/ф, влияет на фунции пищев-го тракта, уч-ют в циркуляции компонентов желчи, расщепление клетчатки и др. компон-ов корма.
5. Распространение микробов в природе
Распространению способствуют малые размеры, ничтожно малый вес, огромная скорость размножения, способность адаптироваться к изменениям окр. среды, температурный фактор.
. Микрофлора воздуха и воды. Количественное и качественное определение микрофлоры воздуха и воды
В воде наиболее заселена 10-100 см глубина. Выше действуют УФЛ. Самоочищение водоема: быстрое течение, УФЛ, минерализация орг. соединений микроорганизмами, t. В быту - фильтры. В чистых водах преобладают кокки, в загрязненных - палочки. Могут быть патогенные: сибирская язва, бруцеллез, рожа, пастереллез.. Коли-титр - минимальный (ГОСТ 333) V воды в котором обнаруживается 1 кишечая палочка. Коли-индекс - кол-во кишечных палочек в 1 л воды (ГОСТ 2-3).
Воздух - неблагоприятная среда для м/о. Но короткое пребывание микроорганизмов в воздухе достаточно для передачи патогенов от больных. Зависит от вентиляции помещений и санитарно-гигиенических норм. Сапрофиты: микрококки, палочки, плесневые и дрожжевые грибы, актиномицеты. Условно-патогенные: споры грибов. Патогогенные: микобактерии, пневмококки, стрептококки.
Определение микрофлоры воздуха и воды:
. ОМЧ: Для воды - берут пробу воды с помощью батометров, делают разведения 1:10, 1:100, заливают МПА, ставят в термостат 24 часа 37 градусов, затем подсчитывают выросшие колонии. Норма для питьевой воды не более 100 КОЕ(колониеобразующих единиц).
Для воздуха - метод седиментации (чашка Петри с МПА, термостат, подсчет), аспирационный метод с использованием аппарата Кротова (аппарат всасывает воздух, оседает на чашке Петри с плотной средой, подсчет), фильтрационный метод, в том числе метод Дьякова (воздух пропускают через МПА и стеклянные бусы, заливают спец. средой для стафилококков и стрептококков, подсчитывают)
. Санитарно-показательные микробы: Для воды - общие (ОКБ 37 градусов) и термотолерантные (ТКБ 44 градуса) колиформные бактерии - бактерии группы кишечной палочки (БГКП). Так же определяют коли-титр и коли-индекс методам мембранных фильтров (мембранные фильтры кладут на асбестовый фильтр Зейтца, фильтруют воду, пинцетом перекладывают на Эндо в чашку Петри, инкубируют, подсчитывают БГКП (Гр-, оксидаза-, споры-, лактоза+)), бродильным метом (посев на среду Кесслера с лактозой, инкубация, пересев на Эндо подсчитывают БГКП). Энтерококки - среда щелочно-полимиксиновая. Cl. Perfringens - среда Вильсона-Блера, железосульфитный агар.
Для воздуха - гемолитические стрептококки, стафилококки (солевые среды - Чистовича).
. Патогенные микроорганизмы.
. Микрофлора почвы. Значение гнилостных микробов в почве
Наиболее благоприятная среда для м/о. Аэробы и анаэробы, патогенные и непатогенные. Является резервуаром патогенных микроорганизмов, таких как: ЭМКАР, столбняк, сибирская язва (почвенные инфекции). Видовой состав зависит от физико-химического состава почвы, видового состава культивируемых растений. В почве присутствует гумус - остатки растительных и животных организмов, и м/о почвы. Больше м/о на глубине 10-20 см.
Оценивают по:
. ОМЧ: разведения почвы 1:10000, 1:100000, 1:1000000 , последние 2 разведения вносят в 2 чашки Петри, заливают агаром и инкубируют, подсчитывают выросшие колонии.
. Санитарно-показательные микроорганизмы: БГКП бродильным методом), энтерококки на щелочно-полимиксиновой среде, Cl. perfringens на среде Вильсона-Блера (газообразование) или железосульфитном агаре (черные колонии в глубине столбика).
. Патогенные микроорганизмы: сибирская язва, бруцеллез, рожа, пастереллез
Роль гнилостных микробов: расщепление белков, поступающих в почву с трупами животных и отмирающими растениями, с образованием промежуточных продуктов (альбумоз, пептонов, амино- и амидокислот), а также дурно пахнущих веществ - индола, сероводорода, меркаптана, летучих жирных кислот.
. Микрофлора кормов. Эпифитная микрофлора. Микробиологические процессы при силосовании кормов
Поверхность растений обильно покрыта м/о - эпифитная м/ф. Капустная, сенная палочки - безвредные сапрофиты, но на скошенных растениях могут интенсивно размножаться и вызывать гниение и брожение - порчу корма. Поэтому консервирют корма: силосование (заквашивание), дрожжевание спец. заквасками.
Силосование:
фаза - бурное размн. эпифитной м/ф, киш. палочки, дрожжей, молочнокислых и гнилостных. Силос разогревается, подкисляется, создаются анаэробн. условия - большая часть м/ф гибнет
фаза - бурное размножение молочнокислых, подавляющих гнилостные и маслянокислые образованием молочной кислоты.
фаза - постепенное отмирание молочнокислых бактерий
Оценивают по:
. ОМЧ: как и почву
. Санитарно-показательные: протей, листерии, кишечная палочка, энтерокки
. Патогенные микроорганизмы: сальмонеллы, листерии, кишечная палочка, анаэробы, сибирская язва, Cl. botulinum.
. Микрофлора молока. Молочнокислое брожение и его практическое значение
Зависит от уровня гигиены производства молока, условий хранения и транспортировки. На 1 мл допускается не более 70-350 м/о. Источники м/ф: сами животные, помещения, воздух, корма, доильное оборудование, средства доставки, персонал. Свежевыдоенное молоко некоторое время обладает бактериальными свойствами (бактерицидная фаза), которые обусловлены наличием в молоке молочных ингибиторов.
При молочнокисл. брожении распад углеводов, многоатомных спиртов и белков до молочной кислоты. Значение: производство заквасок для ряженки, йогуртов, сыра, повышается усвояемость белка, накапливаются витамины гр. В и РР, и антибиотические вещества.
Оценивают по:
. ОМЧ прямым (разведения 1:10000, 1:100000, 1:1000000 заливают агаром, инкубируют, подсчитывают) и косвенным методами (редуктазная и резауриновая проба - обесцвечивание молока происходит медленно, если бактерий мало)
. Коли-титр молока на среде Кесслера, с пересевом на Эндо.
. Патогенные микроорганизмы: стафилококки, стрептококки, возбудители туберкулеза, бруцеллеза, синегнойная палочка.
. Значение микробов в круговороте веществ в природе
Наиболее отчетливо значение проявляется в разложении органических веществ, в окислении водорода, метана, серы, в восстановлении сульфатов.
Фиксация атмосферного азота: азотофиксирующие микроорганизмы симбиотические и несимбиотичские повышают плодородие почвы за счет связывания соединений азота, вносят препараты под бобовые культуры.
Аммонификация белков и мочевины: компоненты тканей погибших растений и животных подвергаются действию гнилостных м/о и азотистые соединения разрушаются с образованием аммиака. Мочевина усвояется только после разложения её уробактериями под действием фермента уреазы.
Нитрификация: аммиак окисляется до азотистой, а затем и до азотной кислоты, которая вступая в соединение с щелочами образует селитру, которая усваиваясь растениями повышает плодородие почвы.
Денитрификация: может быть прямая (бактериями) и косвенная (химическим путем при взаимодействии азотистой кислоты с аминными соединениями.
При минерализации орг. веществ образуется столько же углерода, сколько используется растениями при фотосинтезе.
Разложение клетчатки: образуется углерод, так же может происходить брожение клетчатки (засахаривание, разложение в зависимости от типа брожения на спирты, молочную и масляную кислоту, углекислоту, водород, метан).
Спиртовое брожение: этил. спирт + углекислота.
Молочнокислое брожение: распад углеводов, многоатомных спиртов и белков до молочной кислоты за счет молочнокислых бактерий.
Пропионовокислое брожение: молочная кислота сбраживается дл пропионовой и уксусной кислот, диоксида углерода и воды.
Уксуснокислое брожение: этиловый спирт окисляется до уксусной кислоты под влиянием уксуснокислых бактерий.
Фосфор: его органическая форма не усвояется растениями, микробы производят минерализацию фосфора из органических веществ и превращение фосфорнокислых солей в хорошо растворимые.
Железо: перевод органического железа из окисного (III - нерастворимое) в закисное (II - растворимое) и наоборот осуществляется железобактериями (аэробы).
Сера: сероводород, ядовитый для растений и животных окисляется серобактериями в безвредные, доступные для растений соединения.
. Санитарное значение коли-титра и его определение
Коли-титр - наименьший объем воды в мл, в котором обнаруживается одна кишечная палочка. Вода считается качественной если коли-титр не менее 100. Отбирают 400-500 мл воды в стерильную бутыль и закрывают стерильной пробкой. Из откр. водоемов на глубине 10-15 см от пов-ти, в мелких - 10-15 см от дна. Из крана: в теч. 10 мин спускают воду, обжигают кран - берут пробу. В лаб. не позднее 3 ч.
. Влияние на микробы физических, химических и биологических факторов
Физические: Температура - психрофильные 0-35С, мезофильные 35-45, термофильные 45-75 С. Низкие t - замедл. размн-ие. Высушивание - утрачив. способ. к размн-ию. Давление - сильное влиян. осмот-го давл. Солнечные лучи губительны. Ультразвук - бактер-ое действие.
Химические: ПАВ (поверхностно актив. вещества) мыла, жирные кислоты, моющ. ср-ва повреждают клеточную стенку. Окислители (хлор, йод) вызывают денатурацию белка. Фенолы повреж. стенку и белки клеток. Красители (брил. зелень) бактер. действие, наруш. деление. Соли тяж-ых металлов вызывают коагуляцию белков.
Биолог: Препараты содержащие бактерии конкурирующие с патогенными м/о.
Прежде всего - а/б: 1) из грибов (пенициллин) 2)из бактерий (полимиксин) 3)жив-го происх (лецитин) 4) растит. происх. (лук, чеснок) 5) актиномицетами (стрептомицин). Молочнокислые губительны для гнилостных, из-за выдел. молочной к-ты.
. Антагонизм среди микробов и его практическое значение (примеры)
Когда продукты жизнедеятельности одних микробов вызывают гибель других. Открыл Л. Пастер, использовал Мечников (предложил использование молочнокислых бактерий против гнилостных). Используется для профилактики и лечения болезней, главным образом желудочно-кишечных. Многие штаммы кишечной палочки подавляют и уничтожают стрептококки, стафилококки, сибиреязв. палочку, сальмонеллы, возбудителей злокачественного отека и туберкулеза.
. Антибиотики. Методы определения активности антибиотиков
Антибиотики - БАВ, образуются в проц. жизнедеятельности грибов, бактерий, животных, растений, и синтетическим путем, способные избирательно подавлять рост и убивать м/о, грибы, крупные вирусы, простейшие и некоторые гельминты. Отнесены к химиотерапевтическим средствам и предназначены для избирательного действия на возбудителей во внутренних органах и тканях.
)из грибов (пеницилин)
)из бактерий (полимиксин)
)животного происх (лецитин)
) растит. происх. (лук, чеснок)
) образ. актиномицетами (стрептомицин).
Биологическая активность а/б основана на подавлении роста чувствительного тест-микроба (золот. стафилококк для пенициллина, ешерихия для стрептомицина). Для этого используют диффузии в плотные пит. среды (метод дисков) или жидких (метод серийных разведений). Противомикр. актив. Измеряется тем наименьшим количеством а/б, которое оказывает противомикробное действие. В ЕД-единицах действия, либо в един. массы.
По механизму: 1)ингибирующие синтез бакт. Стенки (пенициллин) 2)нарушающие функцию ЦПМ (полипептиды)3) разрушающие рибосомальные субчастицы и сдерживающие синтез белка (тетрациклины) 4)подавляющие синтез нуклеиновых кислот (ингибиторы синтеза РНК - актиномицин; ингибиторы синтеза ДНК - саркомицин)
Метод дисков: среды (АГВ, диагностический агар) разливают по 20 мл в чашки Петри, делают одномиллиардную взвесь культуры микробов по стандарту мутности, распределяют её равномерно по поверхности среды, раскладывают диски с антибиотиками, помещают в термостат, результаты учитывают по зоне задержки роста вокруг диска.
Метод серийных разведений: среды (МПБ, бульон Хоттингера, 2% МПА, Китта-Тароцци) наливают в пробирки по 2 мл для аэробов и по 9 мл для анаэробов, готовят основной (1000 ЕД/мл) и рабочий(например 0,01-0,1 ЕД возбудителя рожи свиней к пенициллину) растворы антибиотика. Рабочий 0,5 ЕД/мл вносят в первую пробирку, затем 2 мл переносят во вторую, в 3 и т.д. Из последней 2 мл удаляют. Вносят в пробирки по 0,2 мл одномиллионной взвеси культуры микробов. Учет проводят визуально. Отмечают пробирку где отсутствует рост.
. Патогенность и вирулентность у микробов. Факторы патогенности
Патогенность - видовой генетический признак возбудителя, его потенциальная способность вызывать специфический инфекционный процесс при благоприятных условиях. По этому признаку микроорганизмы делятся на патогенные, условно-патогенные, сапрофитные.
Вирулентность - степень патогенности конкретного м/о это т.е индивидуальный признак. Минимальная смертельная доза - наименьшее кол-во м/о или их токсинов, при кот. погиб. большинство опытных животных. Безусловно смертельная доза - гибель 100% жив. Средняя летальная доза - гибель 50%. Токсигенность - способность образовывать токсины, вредно действующие на организм. Инвазивность - способ. преодолевать защитные барьеры, проникать в органы/ткани, размножаться в них, подавлять защитные средства организма.
Факторы патогенности - приспособительные механизмы возбудителей к меняющимся условиям макроорганизма, синтезируемые в виде спец. структур или функциональных молекул, с помощью которых они участвуют в осуществлении инфекционного процесса: 1) микробные ферменты (гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-азы, коллагеназа, коагулаза); 2)поверхностные структуры бактерий, способствующие закреплению в макроорганизме (патогенные организмы, которые закрепляются в организме благодаря ворсинкам, жгутикам, пилям); 3)поверхностные структуры бактерий, обладающие антифагоцитарным действием; 4) факторы с токсической функцией (экзо- и эндотоксины). Первые 3 фактора обуславливают инвазивность, последний - токсичность патогенных микроорганизмов.
. Характеристика основных форм микробов. Размножение микробов
Формы микробов:
) Шаровидная (микро- (мелкие, расположены беспорядочно), дипло- (попарно), стрепто- (в цепочках), тетра- (по четыре), стафилококки (в виде виноградных гроздей), сарцины (пакетами по восемь))
) Палочковидные (Бактерии (не обр. спор; кишечная палочка), Бациллы (обр. споры, их d<клетки, аэробы; возб. сиб. язвы, сенной палочки), Клостридии (обр. споры, их d> клетки, анаэробы; столбняка и ботулизма))
) Извитые (Спирохеты (много мелких завитков (лептоспироз)), Спириллы (неск. крупных завитков (возб. лихорадки Ласса)), Вибрионы (форма запятой (холеры, кампилобактериоза))
Размножение-способность м/о к самовоспроизведению т.е увеличению кол-ва особей микробной популяции, на единицу объема. Размножение м/о происходит в результате: 1)простого поперечн. деление (кокки в разных плоскостях, палочки только в поперечной); 2)почкования у дрожжей; 3)спорообразования у грибов; 4)конъюгации у некоторых грибов и бактерий.
Процесс деления: 1) перед началом разрыв водородных связей, образовавшиеся 2й спирали ДНК расходятся по полюсам; 2) формир. поперечной перегородки из ЦПМ, она делит материнскую клетку на 2 дочерние; 3) параллельно синтезируется клеточная стенка, образуя перегородку; 4)в каждой дочерней однаспиральной ДНК достраивается 2ая цепочка и восстанавливает водородные связи при помощи ДНК-полимераз. Скорость зависит от вида м/о, t, возраста культуры, характера пит. среды.
. Токсины микробов. Характеристика экзо- и эндотоксинов (примеры)
ЭкзотоксиныЭндотоксинылегко попадают в окр.среду из клетоксвязаны с микробной клеткойвысокая активность, избирательное действиеменее токсичны, не избирательнывыражены антигенные свойстваслабые антигенытермолабильнытермостабильнынеустойчивы к протеолитическим ферментамустойчивы к протеолитическим ферментампод действием формалина переходят в анатоксиныболее устойчивы к формалину
Токсины м/о относятся к факторам патогенности, они вредно воздействуют на организм,изменяя его метаболические ф-ии.
Экзо - высокоактивные яды, выделяемые м/о на протяжении жизни в кач-ве продуктов обмена в окруж. среду.
Эндо- менее ядовиты, образуются в рез-те распада м/к - это фрагменты или отдельные хим. копоненты м/к .
Гемолизин - растворяет эритроциты крови(стрепт, стаф), различают ?, ?- и ?- бакт. гемолизин.
Лейкоцидин - подавляет активность лейкоцитов.
Нейротоксин - обладают тропностью к нерв.ткани.
Энтеротоксин - поражают ЖКТ (эшер, стаф)
Некротоксин - вызывает омертвение ткани (сальмонеллы, кокки, анаэробы).
. Стерилизация. Методы и аппаратура для стерилизации. Пастеризация
полное уничтожен. всех м/о. Стекл. и метал. инструменты, бумагу, вату, марлю, лаб. посуду и пит. среды, отраб-е микр. культ.
Физич. метод а) Термич-ий: фламбирование(прожигание), кипячение, сухим жаром (печь Пастера), паром под давлением (автоклав), текучим паром-дробно (аппарат Коха или автоклав не завинч; молоко, желатин, картофель..), тиндализация (дробно 5 дней при 60-65С, для сред сод. яичный белок, сыворотку, вит) б) Облучение: УФЛ, ультразвук, рентген. лучи.
Механич: фильтр-я через бак. фильтры - мембр-ые и глубинные.
Пастеризация - метод частичной стерилизации, предложен Пастером для обработки пищевых продуктов. Сначала нагревают продукты до 65-80 градусов, потом резко охлаждают. При этом погибают вегетативные формы бактерий, но сохраняются споры. Последующее хранение при низкой температуре (4-5 градусов) препятствует прорастанию спор и размножению оставшихся микробов.
. Пути передачи инфекционных болезней (примеры)
Алиментарно (корм, вода, предметы обихода) - передаются кишечные (ботулизм, сальмонелез, колибактериоз) Воздушно-капельным - дыхательные инфекции (стафилококки, стрептококки, туберкулез, грипп, бронхит) Через кровососущих насекомых (трансмиссивный)- кровяные инф-и (чума, тиф, энцефалит, лихорадки) Инф-и кожных покровов и слизис-х - через предметы обихода, прямым контактом, укусом, через рану, половым путем (грибковые инфекции, столбняк, газовая гангрена). Трансплацентарно - передача возбудителя от матери к плоду Колострально - с молоком Трансовариально - через яйцо.
. Определение понятий инфекция, инфекционный процесс, инфекционная болезнь. Виды инфекций
Инфекция- состояние, при котором развивается эволюционно сложившийся комплекс биологических реакций взаимодействия макроорганизмов и патогенных микробов.
Инфекционный процесс-динамика реакций взаимодействия между макро- и микроорганизмами. Он включает в себя внедрение, размножение и распространение патогенного микроба в оргме и реакцию организма на его действие. Инф. процесс может проникать бессимптомно. Харизуется циклическим развитием и включает периоды: 1.инкубационный, это промежуток времени от момента проникнов-ия микробов в организм до проявления первых признаков болезни (час-год); 2.продромальный (предвестника болезни)это появл.первых симптомов болезни(час-день); 3. период развития основ. клин. признаков, появ-ся основные признаки, хар-ые для данной болезни; 4.выздоровление(реконвалесценции)
Инфекционная болезнь - наиболее яркое проявление болезни и инфекционного процесса. Это состояние организма, когда в ответ на воздействие возбудителя в организме развивается патологический процесс.
По характеру проявления инфекционные болезни: кишечные, респираторные, инфекции кожных покровов и слизистых оболочек.
По хар-ру возникновения: экзогенные - заражение в результате попадания микробов извне(чума); эндогенные-условно-патогенные микробы находятся в самом организме, а при ослаблении его резестентности активизируют свои патогенные свойства, вызывая болезнь. Если болезнь вызвана одним возубудителем - простая (моноинфекция), два и более возбудителя смешанная инфекция.
Вторичные (секундарные) инфекции возникают вслед за основной (первичной) инфекцией.
Реинфекция - когда организм переболел инфекцией, но не приобрел стойкого иммунитета и повторно заразился.
Суперинфекция - когда заражается повторно организм, у которого ещё не закончилось основное заболевание.
Рецидивы - возврат симптомов той же болезни (периоды между рецидивами - ремиссии)
По форме течения и клиническому проявлению инфекционные заболевания:
сверхострые-несколько часов, клинические признаки не развиваются из-за гибели; острые-несколько дней, характерно появлением типичных клинических признаков; подострое-более продолжительное, клинические признаки типичны, выражены менее четко; хроническое-годы, клинические признаки выражены слабо или отсутствуют; атипичная форма(абортивная)-типичное развитие болезни внезапно останавливается и наступает выздоровление; типичная- ярко выражены клинические признаки; доброкачественное течение- быстрое выздоровление животного; злокачественное течение-высокая смертность.
. Периоды развития инфекционной болезни
.инкубационный, это промежуток времени от момента проникновения микробов в организм до проявления первых признаков болезни (продолжительность составляет от нескольких дней, месяцев до нескольких лет);
.продромальный (предвестника болезни) это появление первых, не всегда специфических для данной болезни симптомов (продолжительность от нескольких часов до нескольких дней);
.период развития основных клинических признаков (разгара болезни) появляются основные признаки, характерные для данной болезни (афты при ящуре, параличи при бешенстве, расслабление мышц при ботулизме), а также угнетение, высокая температура, нарушение дыхания, пищеварения и т.д.
.выздоровления (реконвалесценции) - постепенное восстановление физиологических функций организма. Клиническое выздоровление при многих инфекционных болезнях не совпадает по времени с освобождением организма от возбудителя.
. Метаболизм (питание) микробов. Классификация микробов по типу питания
Типы питания: голозойный тип (у тех кто имеет органы пищеварения), голофитный (у тех кто не имеет органов пищеварения). Микроорганизмы лишены специальных органов пищеварения, дыхания, выделения, все эти функции выполняют ферменты. У бактерий пит вещества проникают через всю поверхность тела, основе их питания лежат диффузия и осмос. Вода диффундирует в сторону с большей концентрации, а коллоиды в сторону меньшей. Проницаемость веществ через ЦПМ различна: минеральные соединения проникают в клетку легко, а коллоидные вещества (белки, крахмал, клетчатка) не могут проникнуть через мембрану. Для того чтобы белки попали (ассимилировались) в микробную клетку - необходимо расщепить их на продукты, которые могут расщепляться в воде и тогда произойдет всасывание. С водой бактериальная клетка выделяет во внешнюю среду и продукты обмена. При помощи осмоса и диффузии в клетке поддерживается определенная концентрации NaCl и пит. веществ, что способствует её тургору (нормальному напряженному состоянию). В зависимости от концентрации соли в среде различают: плазмолиз (обезвоживание бак.клетки при попадании её в гипертонический раствор), плазмоптис (разбухание цитоплазмат. вещества).
Анаболизм - поглощение и накопление энергии. Катаболизм - выделение энергии.
Классификация микробов по типу питания:
. Углеродный: а)аутотрофы (автотрофы)-синтез. органические веществ из неорганических; б)гетеротрофы-нуждаются в готовых орг соединениях с азотом и углеродом (метатрофы-сапрофиты, живут за счет мертвых субстратов; паратрофы-бактерии, ведущие паразитический образ жизни в организмах
. Азотный: азотофиксирующие м/о (усваивают атмосферный азот), протеолитические м/о (расщепляют нативные белки на пептиды и аминокислоты), дезаминирующие м/о (разлагают не только отдельные аминокислоты, но и небелковые вещества), нитритно-нитратные (усваивают окисленные формы азота).
. Дыхание у микробов. Классификация микробов по типу дыхания (примеры)
Дыхание у микробов-совокакупноть различных хим. реакций, в результате которых освобождается энергия, используемая м/о для усвоения пит. веществ, синтеза белков тела, движения, роста, размножения.
Классификация: 1) Облигатные безусловные аэробы - растут при доступе кислорода до 20% (сиб.язва, туберкулез); 2) Микроаэрофилы-растут при низком сод. кислорода до 1% (бруцеллы, кампилобактерии, лептоспиры); 3)Факультивные анаэробы - способны существовать как при доступе кислорода, так и при его отсутствии (возбудитель рожи, киш. палочка); 4) Облигатные анаэробы - без кислорода (клостридии, столбняка, ботулизма)
У аэробов дыхание-прямое окисление ферментами оксидазой и пероксидазой, непрямое окисление или дегидрирование. У анаэробов дыхание-анаэробное дегидрирование, брожение.
. Спорообразование у микробов. Назвать спорообразующие микробы. Методы окраски на выявление спор в мазках
Споры бактерий - особое состояние покоящихся репродуктивных клеток, характеризующееся резко сниженным уровнем метаболизма и высокой резистентностью. Переход бактерий к спорообразованию наблюдается при истощении питательного субстрата, недостатке углерода, азота, фосфора. Споры могут располагаться центрально (B. anthracis), субтерминально - ближе к концу (Cl. botulinum), терминально (Cl. tetani).порообразование (споруляция) - один из сложнейших процессов дифференцировки бактериальной клетки под контролем комплекса специальных генов.
Стадии спорообразования:
. Подготовительная - изменяется метаболизм, завершается репликация ДНК и происходит её конденсация. Клетка содержит 2 или более нуклеоида. Один локализуется в спорогенной зоне, остальные в цитоплазме спорангия. Синтезируется дипиколиновая кислота.
. Стадия предспоры - со стороны ЦПМ вегетативной клетки происходит врастание двойной мембраны, или септы, в результате образуется проспора, окруженная 2-мя мембранами.
. Образование оболочек - между мембранами образуется зачаточный пептидогликановый слой, над ним толстый слой кортекса, и вокруг наружной мембраны формируется споровая оболочка.
. Созревание споры - завершение обазования всех структур споры, она приобретает термоуст-ть, характерную форму и занимает определенное положение в клетке.
Споры образуют бациллы (сенная пал, сиб. язва), клостридии (ботулизм, столбняк) и единичные виды шаровидных.
Метод Мюллера: 1)фикс.мазок+хром.к-та 5 мин; 2)промыть, высушить; 3)карб.фуксин Циля 3 мин.до паров; 4)серн.к-та 5 сек; 5)промыть; 6)метил.синий 1-2 мин; 7)промыть, высушить. Картина: споры-красные, клетки-синие.
Метод Трухильо: 1)фикс.мазок+фильтр.бумажка+малах.зеленьпо+греть 3 мин.до паров; 2)промыть водой; 3)осн.фуксин 1 мин; 4)промыть, высушить. Картина: споры-зеленые, вегет.клетки - красные.
Метод Пешкова: 1)фикс.мазок+метил.синий Леффлера+греть 30 сек.до паров; 2)промыть водой; 3)нейтрал.красный 30 сек; 4)промыть, высушить. Картина: споры-синие, клетки - красные. Метод Дунаева: 1)фикс.мазок+хлористо-водор.к-та+греть 1-2 мин.до паров; 2)промыть водой; 3)карболовый аурамин+греть 3 мин.до паров; 4)серн.к-та на 5 сек; 5)промыть; 6)р-р родамина "G" на 5 мин; 7)промыть, высушить, в люмин. микроск. Картина: споры светятся золотисто-зеленым, клетки - оранжевые.
. Капсула у микробов, капсулообразующие микробы. Окраска мазков
Капсула - слизистый слой из гомо- и гетерополисах-ов, реже из полипептида. Микро-, макрокапсулы. Содержат капсульный АГ, защищают от механ. повреждений, высыхания, токсинов, фагоцитоза АТ. Является фактором вирулентности. Наличие-важный диагностический признак. Обр. капсулу возбудители пастерелеза, сиб. язвы, тулеремии, бруцеллеза. Капсула слабо воспринимает красящие растворы т.к. сост. из мукополисахаридов и пептидов. Мазки готовят из свежего материала, фиксируют химич. способом, применяют метахроматические красители.
Метод Ольта: 1) фикс.мазок+вод. р-р сафранина+греть 2-3 мин; 2)промыть, высушить. Картина: капсулы бледно-желтые, клетки-красные.
Метод Романовского-Гимза 1)краску Романовского-Гимза разводят водой 1:10; 2)препарат кладут в чашку Петри мазком вниз, залив. краску до мазка на 10-15 мин; 3)промыть, высушить. Картина: капсулы розовые, клетки-фиолетовые/синие.
Метод Михина: 1) фикс.мазок+метил.синий Леффлера+греть 2-3 мин.до паров; 2) промыть, высушить. Картина: капсулы розовые, клетки-синие.
Метод Ребигера: 1) нефикс.мазок+формалиниз.генцианвиолет на 15-20 сек; 2) промыть, высушить. Картина: капсулы-розовые, клетки-фиолетовые.
Метод Бури-Гинса: 1)на предметное стекло наносят каплю канцеряской туши черного цвета; 2)в неё вносят взвесь микробов; 3)шлифованным стеклом растирают каплю; 4)высышивают, химически фиксируют; 5)фуксин Циля 3-5 мин. Картина: капсула-не окрашена, клетки-красные.
. Источники и виды инфекции (экзогенная, эндогенная, смешанная, секундарная, реинфекция, суперинфекция, рецидив)
Источники: специфические возбудители, больной организм. Экзогенные - заражение в результате попадания микробов извне(чума); эндогенные-условно-патогенные микробы находятся в самом организме, а при ослаблении его резестентности активизируют свои патогенные свойства, вызывая болезнь. Если болезнь вызвана одним возбудителем-простая (мононифекция), два и более возбудителя смешанная инфекция. Вторичные (секундарные) инфекции возникают вслед за основной (первичной) инфекцией. Реинфекция - когда организм переболел инфекцией, но не приобрел стойкого иммунитета и повторно заразился. Суперинфекция - когда заражается повторно организм, у которого ещё не закончилось основное заболевание. Рецидивы - возврат симптомов той же болезни (периоды между рецидивами - ремиссии).
27. Генетика и изменчивость у микробов. Виды изменчивости (диссоциация, мутация, трансформация, трансдукция, конъюгация), L-форма микроба
Генетика-наука о наследственности и изменчивости. Задачи изучение и анализ законов передачи наследственных признаков из поколения в поколение, и механизмов их обеспечивающих. Генотип бак: совокупность наследственных факторов: 1) ядерных-хромосомных (геном) 2) неядерных-внехромосомных (плазмид, умеренных фагов и мигрирующих элементов)
Особенности генетической системы: 1) Передача ген. информации, как по вертикали, так и по горизонтали (конъюгация, трансдукция, трансформация); 2) Содержание ДНК зависит от роста, при благоприятных условиях увеличивается до 4 раз.
Плазмиды - небольшие фрагменты ДНК, несущие 40-50 генов. Автономные - не связанные с хромосомой, интегрированные - встроенные в хромосому, трансмиссивные - передаются посредством конъюгации. Они обеспечивают клетку полезнными свойствами, вызывают гибель бактерий схожего типа, контролируют вирулентые свойства многих видов. Транспозоны - линейные молекулы двухнитевой ДНК, встраиваются в различные участки, проявление мутаций.
Фенотип: проявление наследственных морфологических признаков и физиол. процессов. Фенотипическая изменчивость (модификация) - внешние различия между м/о одинаковыми по генотипу: 1) не предается по наследству 2) действует пока есть вызывающий их фактор внешней среды 3)это адаптационная реакция на раздражители 4)обеспечивает выживаемость м/о в изменчивых условиях 5)изменение формы, величины, биохимической активности, культуральных свойств.
Диссоциация - форма культуральной изменчивости-разъединение популяции и возникновениеие S (гладкие) и R (шероховатые) форм-формы М- и О-формы (слизистая и переходная)
Мутация - (генотипическая изменчивость) - внезапное скачкообразное изменение наследственных свойств (качественные или количественные изменения последовательности нуклеотидов в ДНК) Спонтанные (самопроизвольные), индуцированные (направленные). Передача генетической информации: 1)Трансформация- поглощение из окружающей среды свободного фрагмента ДНК клетки-донора; 2)Трансдукция - изменение генома с помощью вирусов-бактериофагов. Общая - переносятся первые попавшиеся кусочки ДНК. Специфическая - определенный кусочек ДНК. Абортивная - перенос участка, который не включается в геном, не вызывает изменений.
Конъюгация - спаривание м/о, передача генетического материала от донора к реципиенту.формы - мутанты бактерий, полностью или частично неспособные синтезировать муреин, из-за антибиотиков, УФ, химических веществ, рентгеновских лучей. Высокая жизнеспособность, не чувствительны к антибиотикам, проникают через бактериальные фильтры, плаценту. Стабильные и нестабильные. Участвуют в развитии хронических инфекций, носительстве возбудителя.
. Иммунитет, виды иммунитета
Иммунитет-состояние невосприимчивости или устойчивости организма к воздействию генетически чужеродных веществ инфекционного (микробы, вирусы, токсины) и неинфекционного (макробелки, полисахариды) характера.
Аутоиммунитет - против своих генетически измененных клеток
Врожденный (наследственный, естественный): Видовой иммунитет (КРС не болеет сапом лошадей), групповой иммунитет (выведены овцы не восприимчивые к сиб.язве), индивидуальный.
Приобретенный (специфический): приобретается в течение жизни, может исчезнуть. Естественный приобретенный: 1)активный (после заболевания), 2)пассивный (через плаценту колостральный). Искусственный приобретенный: 1)активный (после вакцинации), 2) пассивный (сывороточный - введение готовых АТ)
Гуморальный иммунитет обуславливается антителами, вырабатывающимися в ответ на чужеродный агент.
Клеточный иммунитет - фагоцитоз, T- и B-клетки памяти.
. Центральные и периферические органы иммунной системы. Клетки иммунной системы и их роль в образовании иммунитета. Схема иммуногенеза
Центральные органы иммунной системы: Тимус- обучение и дифференциация Т-лимфоцитов. Костный мозг - гемопоэз, образование стволовых клеток из который впоследствие формируются Т- и В-лимфоциты. Фабрициева сумка - у птиц, формирование В-лимфоцитов Перифирические органы иммунной системы: Лимфатические узлы - развитие клеточного иммунитета при антигенной стимуляции. Селезенка - иммунные реакции гуморального типа. Пейеровы бляшки в подслизистом слое тонкого кишечника, преобладают В-лимфоциты Кровь представлена клетками различного назначения:
) Лимфоциты. Т-хелперы стимулируют активность других лимфоцитов, Т-супрессоры-подавляют или ограничивают силу иммунного ответа, Т-киллеры - уничтожают чужие клетки, Т-клетки-памяти-хранят информацию о встрече с АГ. Т-лимфоциты синтезируют интерлейкины (ИЛ) - белки осуществляющие гуморальный контакт регулируют активность стволовых клеток, участвуют в реакции иммунного ответа, медиаторы воспалительных реакций. В-лимфоциты предшественники плазматических клеток, вырабатывающих Ig (M,G,D,A,E) 2)Моноциты - макрофаги, представляют АГ лимфоцитам.
Схема иммуногенеза:
*АГ захватывается фагом, частично разрушается
*Под действием ИЛ-1 усиленная выработка Т-хелперов, выделение ИЛ-2, под действием которого информация об АГ поступает к В-и Т-лимфоцитам
*Из Т-эффекторов образуются клоны клеток, из В-эффекторов образуются плазмоциты и начинается выработка АТ.
. Неспецифические факторы иммунитета и их роль в защите организма животных
Естественные биологические барьеры: кожа (слущивание, бактерицидное действие пота), слизистые (непроницаемы для макромолекул, вирусов, бактерий, слизь и отмирание клеток, лизоцим, слюна, желудочный сок, желчь), гистогематические барьеры (мембраны между кровью и тканью-гематоэнцефалический, гематотимический, плацентарный). Лизоцим фермент повреждающий мембрану, синтезируется нейтрофилами и моноцитами. Много в слюне, слезе.
Фагоцитоз поглощение и переваривание. Макрофаги: моноциты и тканевые макрофаги. Микрофаги: гранулоциты (нейтрофилы) 1) положительный хемотаксис 2) адгезия 3)образование фагосомы 4) фаголизосома 5) удаление
В-лизин фермент активирующий растворение мембран собственными ферментами м/о. Образуется из разрушенных тромбоцитов.
Система комплемента: Пропердин-белковый компонент, обладающий противомикробной и противовирусной активностью. Коплемент-группа белков, обладающих ферментативной активностью и взаимодействующих по типу каскадной реакции. 1) Усиливает соединение АГ с АТ, активацию фагоцитов, 2) Участвует в воспалительных процессах 3)Участвует в процессе свертывания крови.
Интерферон вещество противовирусной защиты, локализуется в очаге инфекции.
. Фагоцитоз и его значение при инфекционных заболеваниях
Фагоцитоз поглощение и переваривание. Макрофаги: моноциты и тканевые макрофаги. Микрофаги: гранулоциты (нейтрофилы) 1) Положительный хемотаксис 2) Адгезия 3)Фагосома 4) Фаголизосома 5) Удаление
Незавершенный фагоцитоз - поглощается чужеродный агент, но не переваривается (туберкулез, лейшманиоз, гонорея)
Роль: очищение крови от м/о, неспецифический клеточный иммунитет, первая необходимая фаза специфического иммунного ответа, естественная резистентность организма, продуцирование лизоцима, 3-й компонента комплемента, некоторых компонентов пропердиновой системы.
. Бактериофаги, их лечебное и диагностическое значение
Бактериофаг-вирус бактерии. Он способен инфицировать клетку, образовать в ней потомство, вызывать её лизис. Широко распространены в почве, воде, экскрементах. Вирулентные фаги проникают, размножаются и лизируют. Умеренные не лизируют, остаются в сост. лизогении. По степени специфичности: полифаги - лизируют родственные бактери, монофаги - бактерии одного вида, фаговары - только определенные варианты данного вида. 1) прикрепление отростками белкового хвоста к клеточной стенке на специфических рецепторных участках, 2) проникновение: ДНК фаг под действием лизоцима проникает через отросток в клетку, 3) синтез фаговой РНК и белков капсида, которые участвуют в синтезе ДНК фага, 4) морфогенез фага, формирование частиц фага. 5) выход частиц фага из разрушенной лизоцимом бактерии. Лизогенные бактерии - бактерии-носители бактериофага. Конверсия-изменение свойств бактерии под влиянием фага.
Их используют для терапии и профилактики инфекционных заболеваний (сальмонеллез, колибактериоз молодняка, гнойные инфекции), для дифференциации бактериальных культур (сибиреязвенных, стафилококковых, рожистых, сальмонеллезных), как индикатор патологических бактерий в окружающей среде (воде, продуктах, выделениях животных) с помощью реакции нарастания титра фага. Фаги выпускаются в жидкой форме против сальмеллеза и колибактериоза телят, сибиреязвенные (фаг-гамма, фаг ВИЭВ) и др.
. Иммуноглобулины (антитела). Характеристика и свойства антител. Классы иммуноглобулинов
Иммуноглобулины-специфические белки, синтезируемые иммунокомпетентными клетками под воздействием АГ и обладающие свойством специфически с ним связываться. Защищают организм от возбудителей инфекционных болезней и генетически чужеродных веществ. Образуются в результате естественного инфицирования, вакцинации живыми или убитыми вакцинами, контакта лимфоидной системы с чужеродными клетками или тканями (трансплантами), либо с собственными аутоантигенами.
Нейтрализующие: антитоксины, антиферменты, антивирусы. Лизирующие - гемолитические и комплементсвязывающие. Коагулирующие - агглютинины и преципитины.
Тепловые (37С), холодовые или криофильные(4С).
Полные (дают видимые реакции), неполные (реакции не видны).
По международной классификации: Ig (G,M,D,A,E). G- (до 90% в крови) участвует в серологических реакциях. Ведущая роль в защите от вирусов и бактерий, нейтализует токсины. М-цитолиз клеток и бактерий, фиксирует на себе комплемент. А-сывороточный нейтрализует токсины, а секреторный защищает слизистые от кишечных и респираторных инфекций. Е-участвует в аллергических реакциях, играет защитную роль при гельминтозных и протозойных заболеваниях. D-находится на лимфоцитах, может активировать комплемент, обладает антивирусной активностью.
. Аллергия и анафилаксия (ГНТ, ГЗТ)
ГНТ - гиперчувствительность немедленного типа возникает после повторного введения аллергена спустя несколько минут, обуславливается антителами, а в основе их генеза лежит реакция аллерген-антитело (анафилаксия, атопия, сывороточная болезнь).
Анафилаксия-состояние повышенной чувствительности на повторное введение чужеродного белка. Анафилаксия развивается через несколько минут от повторного введения аллергена - это связано с циркуляцией Ig G и E. IgЕ может быть на эпителии дыхательных путей, ЖКТ, в гладкой мускулатуре = анафилакт. шок. Медиаторы анафилаксии: гистамин, серотонин, брадикинин. 1я доза - сенсибилизирующая, 2я - разрешающая. Десенсибилизация-дробное введение - сначала вводят очень маленькую дозу (димедрол, супрастин, атропин).
Атопия-естественная сверхчуствительность, спонтанно возникающая у предрасположенных к аллергии животных и людей (бронхиальная асма, аллергический ринит, конъюктивит).
Сывороточная болезнь-после введения чужеродной сыворотки, харатеризуется появлением сыпи и сопровождается сильным зудом, повышением температуры тела, без смертельного исхода.
ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа (аллергия).
Аллергия - измененная реактивность, или чувствительность организма на какие-либо вещества. Аллергены-вещества изменяющие реактивность организма (животного и растительного происхождения, лекарственные вещества, липоиды, сложные углеводы). Пищевая, лекарственная и др. аллергии.
. Антигены и их характеристика, антигенное строение микробной клетки
Антигены (АГ)- высокомолекулярные генетически чужеродные вещества, при попадании в организм вызывающие развитие специфических иммунологических реакций. Это белки, или белковые соединения с липидами и полисахаридами. Антигенность - способность антигена вызывать иммунный ответ. Иммуногенность - способность создавать имммунитет. Специфичность - особенность строения, по которой АГ отличаются друг от друга. Ее определяет антигенная детерминанта-участок, который соединяется с вырабатываемым для него АТ.
Полноценные АГ- вызывают образ АТ. Неполноценные - гаптены, это сложн. углеводы, липиды, не вызывают образования АТ, но вступают в сепцифическую реакцию. При соединении с белком становятся полноценными. Видовая, групповая, органная (тканевая)и стадиоспецифическая специфичность (возн. в эмбриогенезе). Аутоантигены-белки собственных тканей. По расположению в микробной клетке: капсульные (к), поверхностные, соматические (о), жгутиковые (н). Строение: белок и детерминантная группа (полисах, липиды, а/к остатки).
36. Типы брожения и их практическое значение
Спиртовое м/о превращает сахара с образованием этил.спирта, углекислоты и энергии. Возбудители - некоторые дрожжи. Производство спирта, вина, пива, хлеба, кормовые дрожжи.
Молочнокислое - распад углеводов, белков, спиртов до молочной кислоты. Некоторые стрептококки, лакто- и бифидобактерии. Произвоство кисломол. продуктов, заквасок.
Пропионовокислое - пропионобактерии сбраживают молочную кислоту, образуя пропионовую и уксусную кислоты. Получение витамина В12.
Маслянокислое осуществляется некоторыми клостридиями - разложение сахаров до ПВК. Прогоркание масел, жиров, порча кормов.
Уксуснокислое уксуснокислые бактерии окисляют этил.спирт до уксусной кислоты. Произ. Пищевого уксуса из вина, спирта. Силосование кормов.
. Бактериологический метод диагностики, сущность и назначение метода
Включает: Бактериоскопический - изучение морфологических особенностей м/о (форма, размер, наличие спор/капсул, расположение в мазках, подвижность, особенности внутренней структуры), их спосбность воспринимать окраску, отношение к спиртам, щелочам, кислотам. Собственно бактериологический - из пат.мат. выделяют чистую культуру возбудителя и изучают ее культурально-биохимические свойства. Биологический (биопроба) определение патогенных свойств заражением лабораторных животных.
38. Методы получения чистых культур аэробов и анаэробов
Чистая культ - рост на питательной среде микробов одного вида. Для изучения свойств, по их совокупности установить видововую принадлежность.
Аэробов: Метод механического разъединения: 1) Дробный посев по Дригальскому - а) на МПА в чашках Петри вносят каплю исследуемого мат., в центр. Стерил. шпателем рапред-ют по всей чашке, затем не прожиг, перенести на 2ю и 3ю чашки = изолир. колонии в посл. чашке. б) бак.петлей штрихами, можно в одной чашке разд-ой на три сектора. 2) Дроб. посев на распл. МПА по методу Коха в пробирки по 10 мл МПА, расплав. вод. бане, охлажд. до 45-50. В проб +каплю. Вращают между ладоней. Пастер.пипет. перенести во вторую, аналог. в третью. Разлив. по чашкам, в термостат. Метод использования биол. особен. (уничтож. сопутствующей микрофлоры): 1) Физический (для споровых бацилл и клостридий) перед посевом нагрев. до 80С 20 мин 2) Химический (устойч. микобактерий к кислотам и щелочам, туберкулез) 6-18% серной кислоты на 30 мин, отмывают физ.рас, осадок высев. на среду с бактериостат. краской. 3) Биологический-когда пат. мат. очень загрязнен то зараж. животн, вскрывают, и посев из крови сердца и органов. По подвижности: Метод Шукевича - в конденсационную жидкость скошенного агара, микробы с ползучим ростом переходят на поверхность агара; Выдел-ие на элективных средах - (м/о устойч. к а/б, красителям, желч. кислотам..) Берут электив. среды с ростовым фактором для опред. м/о и ингибиторами для других.
Анаэробов: 1) на поверх-ти среды -высеваю на поверхность сахарно-кровян. агара Цейсслера дробно, шпателем. Помещ. в анаэростат, эксикаторы. 2) в глубине: 1. посев в трубки Вейона и под стекло по Перетцу 3-4 проб. с сахарн. агаром, расплавл-ют, охлажд до 45 , далее дробно как у Коха, но выливают в трубки Вейона или в чашки Петри со стекл. пласт. по Перетцу. Когда застынут - в термостат, 37С, 24-28ч. Вырез-ют скальпелем изол-ую колонию и перен. в среду Китта-Тароцци. 2. глубин. посев в плотные среды в чашку/пробирку +исследуемый. мат. с физ. рас-ом хлор.натрия, заливают расплавлен. и охлажд. средой (сахарный агар, среда Вильсона-Блэра), перемешивают, после застыв-я подсуш-ют и залив. той же средой на 4 мм.
. Простые, специальные и дифференциально-диагностические среды, элективные среды
Простые (универсальные среды) - ПВ, МПБ, МПА, МПЖ, молоко. Эти среды для многих неприхотлив. м/о. Также служат основой для специальных сред.
Спец-ые для избирательного культивирования опред-х видов, изуч. св-в и хранения: 1) Спец. обогащенные - для не размножающихся на простых. Содер. необх-ые пит. в-ва и ростов-е доб-ки. Для микобактерий - яичные среды Петраньяни, для анаэробов - Китта-Тароцци, сахарно-кровян. агар Ц., для стрептококк - глюкозо-сывор-й бульон и агар. 2)Элективные - избирательного роста. Хорошо растут одни, и плохо др. Оптим. для вида состав пит. в-в и бактериостат-е доб-ки (анилин. краски, а/б, желчные соли.) Среда Петраньяни для тубер-ых содер-ит малахит-й зеленый, среда Кесслера для кишечн. пал. - бычью желчь и генцианвиолет, Среда Эндо для энтеробак - основ. фуксин и сульфит натрия. Низко- и высоко-селективные. 3) Дифференциально-диагност. - для дифферен-ии м/о по культур-ым и биохим-им св-ам. В состав включают субстрат (по котор. дифф-ют) и индикатор. М/о ферментируют субстрат, накапл-ют продукты расщепления, окрашивая среду и колонии в цвет индикатора. Жидкие (среда Гисса, молоко с метиленовым синим), полужидкие (полужид. агар с индик. ВР), плотные (Эндо, Левина, ВСА) 4)Комбинированные несколько субстратов и индикаторов (трехсахар-й агар Олькеницкого) - одновр-я диффер-я по ряду признаков.
40. Изменения, наблюдаемые в простых питательных средах, возникающие при росте чистой культуры микробов
В жидких: помутнение (равномерное, интенсивное, умеренное, слабое), образование пленки на поверхности (цвет, оттенок, толщину, характер, консисистенця), поднимается на стенки пробирки, образование осадка (обильный, незначит, рыхлый, плотный, зернистый, хлопьевидный, слизистый, цветной). При встрях. осадок разбив-ся обр. равном. помутнение, либо обр. хлопья, может подниматься "косичкой". Пристеночный рост.
Полужидкие: по уколу в виде белов-го стержня, окруж. среда прозр. Если м/о подвижен - помутнение.
Плотные: образованиие колоний (изолир-е, слившиеся, форма, размер,край, поверх-ть, прозрачность, цвет, профиль, консистенция, налет, рост по штриху).
. Серологический метод диагностики инфекционных заболевания и его значение. Сущность серологической диагностики и методы
Выявляют специфические АТ в сыворотке крови больных и иммунизированных животных, используя заведомо известный АГ; или определяют наличие неизвестного Аг с помощью известных диагностич. иммунных сывороток. Можно определить тип и вид м/о, выделенного из пат. мат. Сущность серолог. р-ия в специфическом взаимодейс. АГ с соответствующими АТ. В них присут. минимум 2 компонента: АГ и АТ. Внешние проявления взаимодействия АГ с АТ в пробирке - преципитация (помутнение), агглютинация (склеивание), бактериолиз (растворение микроб. тел)
Методы:РП (кольце-, диск-преципитация), РА (на стекле, классический метод в пробирках, кольцевая р. с молоком), РСК (бактериолиз + гемилитич. системы).
42. Характеристика компонентов, сущность техники постановки и учет РСК. Контроли реакции
Для обнар-ия спец-их АТ в исслед. сыворотке по извест. АГ или наоборот. Широко примен. для диагнос-ки: бруцеллеза, сапа, чумы КРС, ящура. Участвуют 2 системы: Бактериолитическая (БС): Антитела (исслед. сыворотки или диагност-ой), Антиген, Комплемент (комплекс белков, актив-ся при наличии комплекса АГ+АТ = лизис АГ, предварительно его титруют). Гемолитическая (ГС): Гемолизин (сыворотка кролика, иммунизированная эритроцитами барана, содержащая АТ к ним), лизирует эритроциты ТОЛЬКО в присутствии комплемента (К), Эритроциты барана (АГ для гемолизина)
Условия: разрушить комплемент сыворотки нагрев. в бане, сначала БС а потом ГС, компоненты перед р-ей титруют, исслед. сыв. в рав-ии 1:5 и 1:10
Сущность: Если в БС образуется комплекс АГ+АТ, то К связывается с ним, и для ГС не остается К = задержка гемолиза эритроцитов
Полож. - эритр. в взвеси, жидкость мутная, потом они оседают, прозрач. жидк.
Отриц - К идет на ГС - эритроциты гемолизируются = жидк. прозрач, красная - лаковая.
Титр гемолизина - максим. разведение, при кот. он, в присут-ии опт. К, способен полностью лизировать эритр. за 10 мин 37-38С
Титр комплемента -его миним. кол-во, вызыв. полный лизис эритроцитов в проб. с отриц. сывороткой и АГ, и с полож. сывор. без. АГ, в теч 20 мин 37-38С.
Контроли реакции: 1) отриц. сыворотка в раз 1:5 и 1:10 с АГ и без 2)полож. бруцеллезная сыворотка с АГ и без 3) ГС
Учет оценивается в плюсах, учитывается цвет надосадочной жидкости и наличие осадка из эритроцитов.
43. Сущность техники постановки, учет и контроли РА
Агглютинация - склеивание микробных тел в результате специфического взаимодействия АГ и АТ, которые оседают на дно пробирки, обр. осадок "зонтика". Для диагностики бруцеллеза, сальмонеллеза, лептоспироза, листериоза, колибактериоза.
компонента: агглютиноген и агглютинин = осадок агглютинат
РА на стекле а) на обезжир. стекло +исслед-ую сыворотку и смеш. с каплей АГ б) на обезж. пред. стекло + каплю физ. р-ра, туда бак. петлей +культуру с плотной пит. среды + капля полож-ой сыв-ки. Положит: когда когда АГ исслед. культ. спец-ны АТ имм-х сыв-к - появл-ся хлопья агглютината Отриц-я: при несоотв-вии равном-ое помутнение взвеси. Контроли:1) физ. р-р +полож. сывор-ка 2)физ. р-р+АГ-диагн-ум 3) АГ-диаг +полож. сывор-ка.
Кольцевая с молоком: на благоп. стад по бруцеллезу, оценка молока. Цветной бруц-ый АГ, молоко, полож-ая бруцел-я сыворотка. В пробирки с молоком 2 см2, вносят АГ 0,1см2, перемешивают, в термостат 37-38С на 1 час. Контроли: 1)молоко здоровой коровы+цветной бруц. АГ 2) молоко здоровой коровы в смеси с полож. сыв-кой +цвет. бруц. АГ.
Учет: +++ синее кольцо, остальное белое; ++ достат. выраж. синее кольцо; +синее кольцо слабо, столбик синий; - весь столбик раномерно синий, сливки белые.
. Сущность техники постановки, учет и контроли РП
Осадочная р-я. Участвуют преципитиноген и преципитин = осадок преципитат.
Кольцепреципитация для диагности сиб. язвы. АГ от павших жив, биофабричный АГ, станд сибиреязвенная сыв-ка. Метод наслаивания-в проб. добавляют сибиреязв. сыв-ку и осторож. наслаив-т исслед. АГ (или метод подслаивания)
Контроли: 1)с полож. сыв+станд. АГ 2) с полож. сыв+физ.р-р 3) с полож. сыв+экстракт тканей здоров. жив.
Полож: серо-белый диск на границе. Отриц: прозрачная граница.
. Метод флуорохромирования и метод флуоресцирующих антител (МФА) при диагностике бактериальных инфекционных болезней. Сущность и техника
Основан на способности объекта светиться при пропускании через него пучка УФЛ. Для окрашивания используют флюорохромные красители (ауромин, родамин G, ФИТЦ). Повышается контрастность и облегчаетя обнаружение возбудителей. Метод окраски по Бойю для обнар. туберк. палочки. Добавляют смесь аурамина с родамином, нагрев 3-4 мин, слив, обесцвеч. 10-15 мин 3% р-ом хлористоводородного спирта, промыв, КMnO4 20-30сек, слив, докраш. 1% р-ом метилен. синего, промыв, суш. На темном фоне оранж. свеч. туберк.
МФА - микроскопическое исследование иммун. комплекса, с использ-ем АТ к которому присоединяют флюорохром = светятся в УФЛ. Микробный АГ фиксир. на пред. стекле, обрабатывают люминисцентными АТ, промывают, микроскопируют в люмин. микроскоп. Если АТ соответствуют, то прочно прикрепляется к АГ.
. Роль возбудителей, макроорганизма и условий внешней среды в возникновении и развитии болезни
Возникновение и развитие болезни зависит от:
*возбудителя (вирулентности возбудителя, дозы микроба-возубудителя
*макроорганизма (реактивности макроорганизма (способности проявлять защитно-приспособительные функции), конституции и кондиции макроорганизма, состояния ЦНС макроорганизма, возраст и порода животного (телята до 3-месячного возраста почти никогда не болеют бруцеллезом, поросята до 2-3 месяцев реже болеют рожей свиней, колибактериозом заболевает только молодняк, ЭМКАР поражает телят от 3 месяцев до 4 лет.
*условий внешней среды
Вызванное любой причиной ослабление организма способствует развитию инфекции.
Голодание - недостаток того или иного питательного вещества: витаминов, фосфора, кальция.
Водный режим - снижается сопротивляемость к инфекциям.
Температура - при переохлаждении простудные и диарейные заболевания, у вакцинированных с температурой снижается напряженность иммунитета.
Утомление - обостряются заболевания, такие как сап, инфекционная анемия, пастереллез.
Нарушение санитарно-зоогигиенических норм содержания животных - повышенная влажность, отсутствие вентиляции, недостаточная освещенность помещений и другие ведут к снижению общей сопротивляемости организма.
. Биологические препараты, применяемые для лечения, диагностики и профилактики бактериальных болезней (примеры)
Лечение: бактериофаги, сыворотки (колибактериоз, противопастереллезная), антибиотики (туберкулез), иммуноглобулины (сибирская язва)
Профилактика: БЦЖ (туберкулез), живые и убитые вакцины (бруцеллез, колибактериоз), концентрированная формолвакцина, поливалентная вакцина (колибактериоз), преципитирующая формолвакцина свиней, овец (пастереллез).
Диагностика: паратуберкулин (паратуберкулез), бруцеллин (бруцеллез), проба Манту (туберкуез), туберкулин (туберкулез), тулярин (туляремия), антраксин (сибирская язва).
. Понятия о вакцинах, принципы их приготовления. Характеристика моновалентных, поливалентных и ассоциированных вакцин
Вакцины-средства специфической активной иммунопрофилактики.
Моновалентные - применяют для создания невосприимчивости к одному возбудителю.
Живые вакцины готовят из штаммов м/о с ослабленной вирулентностью (высокая иммуногенность, однократная иммунизация, введение естественными путями).
Инактивированные вакцины из инактивированных м/о (проверяют на безвредность на животных, на стерильность, на активность).
Химические вакцины применяют для профилактики, представляют собой антигены и антигенные комплексы, извлеченные из микробных культур и очищенные от балластных иммунизирующих культур.
Анатоксин это токсин, утративший свою токсичность под действием химических или физических факторов, но сохранивший антигенные и иммуногенные свойства (аналоги инактивированных вакцин.
Поливалентные вакцины готовят из нескольких типов м/о одного вида.
Ассоциированные - содержи АГ разных видов возбудителей.
Вакцинные препараты вводят внутрь, подкожно и внутрикожно, парентерально, интраназаль-но и ингаляционно. Способ введения определяют свойства препарата. Живые вакцины можно вводить накожно (скарификацией), интраназально или перорально; анатоксины вводят подкожно, а неживые корпускулярные вакцины - парентерально. При массовых иммунизациях выбирают наиболее экономичный способ, обеспечивающий быстрое и эффективное создание иммунной прослойки (невосприимчивых лиц) в популяции, особенно в эпидемический период. Например, интраназальная вакцинация против гриппа в период перед предполагаемой эпидемией или пандемией позволяет быстро и экономически эффективно создать иммунную прослойку в популяции. По степени необходимости выделяют плановую (обязательную) вакцинацию и вакцинацию по эпидемиологическим показаниям. Первую проводят в соответствии с регламентированным календарём иммунопрофилактики наиболее распространённых или опасных инфекций. Вакцинацию по эпидемиологическим показаниям проводят для срочного создания иммунитета у подвергающихся риску развития инфекции.
. Принципы приготовления и контроля живых и убитых (инактивированных) вакцин (примеры)
Способы получения ослабленных: 1) Использование ослабленных штаммов, возникших в естественной среде возбудителей. 2) Искусственное получение ослабленных м/о в лаб. условиях: выращивание на искусственных питательных средах, перевод возбудителя на другой вид восприимчивого или невосприимчивого животного. 3) Ослабление мутагенами физической природы. 4) Комбинированные методы получения вакцинных штаммов в лабораторных условиях. Вакцины против сальмонеллеза, пастереллеза, бруцеллеза, туляремии, листериоза, рожи свиней, сибирской язвы.
Приготовленные убитых: используют высоковирулентные и иммуногенные штаммы, выращиваемые в жидких средах в котлах-реакторах. Бактериальную массу собирают и инактивируют (нагревание, формалин, фенол.) Проверяют эталонами различной мутности, подогнаными к мутности взвеси бактерий определенной концентрации. Проверяют на стерильность, безвредность, активность. Вакцины против грибов, дрожжей, анаэробных и аэробных бактерий.
50. Принципы приготовления и контроля иммунных и гипериммунных сывороток
В качестве продуцентов используют лошадей, мулов, ослов. Гипериммунизацию осуществляют нарастающими дозами АГ. Когда в крови максимальное количество АТ - берут кровь, выделяют сыворотку, стерилизуют. Контроль на стерильность на питательных средах. Вводят внутривенно и внутримышечно.
Сыворотка реконвалесцентов - сыворотка крови переболевших животных, содержащая специфические антитела, применяется с лечебной и профилактической целью.
Диагностические сыворотки содержат специфические АТ к определенному АГ.
. Характеристика микрофлоры, выделяемой при маститах. Бактериологическая диагностика маститов
Мастит - воспаление молочных желез, возникающее в ответ на воздействие факторов внешней и внутренней среды, при снижении резистентности организма животных и осложнений инфекции. В молочной железе могут возникать разнообразные воспалительные процессы, характер которых зависит от состояния организма животного, причины, вызвавшей воспаление, предрасполагающих условий, на фоне которых оно протекает. Возбудителями воспалительного процесса вымени могут быть различные микроорганизмы, в результате действия которых реакция молока отклоняется от нормы и реакция молока из слабокислой переходит в щелочную. Молоко становится солено - горьким, в нем появляются хлопья или тянущиеся нити. Позднее выделяется гнойная жидкость, иногда с неприятным запахом. Наиболее опасное поражение вымени вызывают маститные стрептококки - Streptococcus aqalactiae.
В лабораторию-молоко, гной из абсцессов, гнойные выделения из пораженных частей вымени.
Морфология: Гр +, Споры -, Капсула-, Подвижность-. Мелкие кокки, цепями. Факультативные анаэробы.
Рост: на кров. МПА - выявление скрытой гемолитической активности, МПБ - помутнение, крупинчатый осадок, МПА с глюкозой - мелкие прозрачные круглые колонии
Биохимические свойства - глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу до к-ты, CAMP-метод на кровяном агаре с ?-гемолитическим стафилакокком, гемолиз -прозрачная и зеленоватая зоны.
Серологические методы: РП, РА.
Биопроба: заражают подкожно или внутрибрюшинно белых мышей, кроликов, наблюдают гибель.
. Патогенные стрептококки и заболевания, вызываемые ими. Бактериологическая диагностика стрептококкозов (морфология, культуральные свойства, биопроба)
. pyogenes -гнойно-воспалительные процессы, ангина. agalactiae - мастит.. еqui - мыт лошадей.. pneumoniae - пневмония молодняка (образует капсулу)
В лабораторию-молоко, гной из абсцессов, гнойные выделения из пораженных частей вымени, слизь, соскобы эпителия, моча, кровь, раневой экссудат, кал, пораженные органы.
Морфология: Гр +, Споры -, Капсула-, Подвижность-. Мелкие кокки, длинными и короткими цепями. Факультативные анаэробы.
Рост: на кров. МПА - выявление скрытой гемолитической активности, МПБ - помутнение, крупинчатый осадок, МПА с глюкозой - мелкие прозрачные круглые колонии
Биохимические свойства - глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу до к-ты, CAMP-метод на кровяном агаре с ?-гемолитическим стафилакокком, гемолиз -прозрачная и зеленоватая зоны.
Дифференцируют: Str. pyogenes гидролизует гиппурат натрия, Str. agalactiae свертывает молоко и проявляет скрытую гемолитическую активность, Str. еqui не растет на среде с добавлением мытного анатоксина, Str. pneumoniae лизируется 10%-й желчью.
Серологические методы: РП, РА.
Биопроба: заражают подкожно или внутрибрюшинно белых мышей, кроликов, наблюдают гибель.
. Стафилококки и заболевания, вызываемые ими. Бактериологическая диагностика стафилококкозов. Дифференциация патогенных стафилококков от непатогенных
Род Staphylococcus: S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus семейство Micrococceae
Аэробы или факультативные анаэробы. Вызывают: абсцессы, экземы, отиты, маститы, эндометриты, циститы, пневмонии.
В лабораторию отправляют: раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделения из половых органов при эндометрите, кровь из яремной вены при септицемии.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность. Кокки в форме грозди винограда
Рост: солелюбивые - желточно-солевой агар Чистовича, МПБ - обильное помутнение и слизистый осадок. МПА - крупные S-колонии лимонно-желтого цвета за счет каротиноидного пигмента, Кровяной агар - зона ?-гемолиза
Биохимические свойства: ферментирует лактозу, сахарозу; выделяет NH4, H2, лецитиназа+(посев на желточную среду), ДНК-зная акт.+, плазмокоагуляция
Биопроба: 1)Дерматонектротическая- кроликам в ухо внутрикожно 0,2мл - 24-48 часов - гибель; 2)На котятах - спаивают 10-15мл фильтрата с молоком - рвота, понос, гибель; 3)Летальная проба-кроликам в/в гибель; 4)Вирулентность для мышей-подкожно, абсцесс, гибель.
Непатогенные: лецитиназа-, плазмокоагуляция-, гемолиз-, манит-, пробы-, фаготипирование-, ДНК-аза-, пигментирование-, у ПАТОГЕННЫХ ВСЕ ЭТИ пункты +
. Бактериологическая диагностика рожи свиней. Специфическая профилактика заболевания
rhusiopathiae,
Болеют свиньи (3месяца-год), ягнята (3нед и) + человек. Острая септическая форма - сине-красные пятна на коже, при хронической форме - в суставах, на клапанах сердце. Молниеносная форма - удушье, отек легких, гибель через сутки.
В лабораторию: кусочки паренхиматозных органов, трубчатая кость, сердце, сыворотка крови.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула- Подвижность-. Прямые или слегка изогнутые палочки располагаются попарно, одиночно и в виде скоплений. Микроаэрофил.
Рост: МПБ - слабое помутнение, пылевидный осадок "муаровые волны"; МПЖ - ершик, МПА - S-колонии, росинчатые, прозрачные, иногда с сероватым оттенком. Элективная среда - Сент-Иваньи.
Биохимические свойства: глюкозу, лактозу, галактозу - до газа и к-ты, H2S+, Каталаза-, Индол-
Биопроба - мышам в/м 0,1-0,2мл, голубям в/м 0,2-0,3мл, смотрим 6 суток
Серодиагностика: 1)РА на стекле (противорожистая рожистая сыворотка + центрифугированная культура с 1% формальдегида) 2)МФА для выявления возбудителя в мазках из патматериала с люминесцирующей сывороткой.
Профилактика: живая вакцина из штамма (не образующего H2S) ВР-2, ассоциированная вакцина против рожи и чумы свиней.
. Лабораторная диагностика листериоза: бактериологическая и серологическая. Специфическая профилактика заболевания
monocytogenes. Поражения ЦНС, слепота, вертячка у овец и коз, заболевания половых органов, маститы, аборты, наблюдаются признаки септицемии, протекает остро и хронически.
В лабораторию: труп целиком, голова (для исследования мозга), паренх органы, аборт-плод, плод оболочки, молоко при маститах, истечение из половых органов, кровь.
Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность-(+тольков молодой культуре при 20C). Палочки - поодиночке, парами, в виде палисада //// или V. Психрофил
Рост: Жидкие- едва заметное помутнение, слизистый осадок, плотные - S-колонии, росинчатой формы. Печеночные среды, глюкозные, Элективная среда с теллуритом калия и глицерином. Кровяной агар - зона ?-гемолиза.
Биохимические свойства: МПЖ не разжижает, Молоко не изменяет, H2S-, Каталаза+, Салицин+, обесцвечивает краски
Биопроба:
) конъюктивальная проба на морских свинках-развивается кератоконъюктивит;
)дерматонекротическая проба-кроликам или морским свинкам внутрикожно в ухо-развивается очаговый некроз; 3)На мышатах сосунках-п/к гибел
Серодиагностика: РСК и РА с АГ 1 и 2 серогрупп, идентификация - РА на стекле. Экспресс-МФА
Профилактика - сухая живая вакцина из штамма АУФ (авирулентная ослабленная УФ).
. Диагностика пастереллеза. Биопрепараты для лечения и профилактики
multocida. Инфекционная болезнь многих видов животных и птиц. Острое - септицемия, подострое и хроническое - поражение легких.
В лабораторию посылается селезенка, печень, почка, кровь сердца, лимфатические узлы, пораженные участки легких и регионарные лимфоузлы.
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула + (не имеет диагностического значения), Подвижность-. Короткие палочковидные бактерии, биполяры, с закругленными концами, вплоть до коккобактерий. Располагаются единично, попарно. Факультативные анаэробы.
Рост: кровяной и сыворотчный МПА и МПБ. На жидких-помутнение, осадок в виде косички. На плотных-колонии мелкие прозрачные, росинчатые.
Биохимические свойства - сахарозу, глюкоза, сорбит, маннит до кислоты; молоко не свертывают, лактоза-, желатина-, гемолиз-, каталаза+
Биопроба - подкожно мышей, кроликов, птиц внутримышечно - быстрая гибель. Препараты: сухие живые вакцины против пастереллеза, формолвакцина эмульгированная, полужидкая гидроокись алюминиевая.
. Дифференциальная диагностика рожи свиней и листериоза
ПоказателиErysipelothrix rhusiopathiaeListeria momocytogenes1.ПалочкаТонкая, стройнаяКоротка, толстая2.Подвижность-При 20С3.Рост на МПЖЕршиком По уколу4.Ферментация салицина-+5.Тест на каталазу-+6.Образование H2S+-7.Обесцвечивание красок-+8.Гемолитическая активность-+9.Лизис бактериофагом-+10.Конъюктивальная проба-+11.Дермонекротическая проба-+12.РА с листер.сывороткой-+
. Гноеродные микроогранизмы кокки и бактерии. Морфологические и культуральные свойства
Гноеродные бактерии, пиогенные бактерии (от греч.(греческий) pэon - гной и gens - рождающий, рожденный), бактерии, способные вызывать местное гнойное воспаление или общую, генеративную, инфекцию (пиемия, сепсис). К гноеродным относятся гноеродные кокки (многие стафилококки, стрептококки,) и некоторые др. бактерии (группа протея, синегнойная, сибиреязвенная, а иногда и кишечная палочка). Г. б. вызывают гнойное воспаление слизистых оболочек серозных полостей (брюшины, плевры, перикарда) или в глубине тканей (гнойная инфильтрация, флегмона и др.).
Возбудитель на русскомВозбудитель на латыниМорфологические свойстваКультуральные свойства1.ПротейProteus vulgaris Proteus mirabilisГр-,Сп-,Кап-,Подв+ палочка, аэробМПБ-помут,осад,пленк МПА-вуалеобр.рост H2S+Индол+ Желатина+ Фенилаланин+2.Синегнойная палочкаPseudomonas aeruginosaГр-,Сп-,Кап-,Подв+ палочка, аэробМПБ-пом,осад косичк. МПА-колон.зелен. Оксидаза+ Аммиак+МПЖ+ Гемолиз+ Хлороформ+(син.ос)3.Кишечная палочкаEscherichia coliГр-,Сп-,Кап-,Подв+ палочка, фак.анаэрМПБ-помут,осадок МПА-серобел.колон. Гемолиз+ 3сах Олькен-желтый Эндо-темно-малин Левина-фиол.или чер. Плоскирева-розов. Лактоза+4.Сибиреязвенная палочкаBacillus anthracisГр+,Сп+,Кап+,Подв- палочка, фак.анаэрМПБ-осадок МПА-колонии Гемолиз- МПЖ-елочкой Феномен жемч.ож.+5.СтафилококкиS. aureus S. epidermidis S. saprophyticusГр+,Сп-,Кап-,Подв- Вин.кокки, фак.анаэр солелюбивыеЖидк-помут,осадок Чистовича-кол.желт Гемолиз+ Маннит+ Желатина+ Плазмокоагуляция+6.СтрептококкиStr. pyogenes Str. agalactiiae Str. equi Str. pneuminiaeГр+,Сп-,Кап-,Подв- Цеп.кокков, фак.анаэр Кров.среды, глюкозн. Жидк.-помут,осадок Плотн.-рос.колонии Глюк.Сахар,Манит+ Гемолиз+
. Бакдиагностка и серодиагностика сибирской язвы
antracis, почвенная инфекция
Болеют КРС, свиньи +человек. Труп вздут, окоченения нет, красн пена - трупы не вскрывая сжигают.
В лабораторию - мазок из "пены", ухо, у свиней при скрытой форме заглот лимфоузлы и селезенку.
Морфология: Гр+, Споры+ , Капсула+ общая для цепочки, Подвижность-. Палочки в виде цепочек.
Рост: МПБ - прозрачн, на дне комочки в виде ваты, МПЖ - елочка верхушкой вниз, воронка разжижения (аэроб), МПА - R-колонии (голова медузы, грива льва), Агар с пенициллином - жемчужное ожерелье
Биопроба - мышам подкожно в корень хвоста 0,1мл, свинкам 0,2мл, кроликам 0,3мл.
Серологич - РП по Асколи (несвежий материал) и РДискП, МФА и ИФА
ПЦР-обнаружение генов, кодирующих синтез токсина и капсулы.
Аллергический метод-у людей вводят антраксин в предплечье (у больных,переболевших, привитых - зона воспаления больше 15мм).
. Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы и эмфизематозного карбункула
ПризнакиBacillus antrhracisClostridium chauvoei1.Подвижность-+2.Спорообразование+спора меньше диаметра кл.+спора больше диаметра кл.3.Капсулообразование+-4.Культивированиефакультативный анаэробанаэроб5.Питательные средыпростыеспециальные6.Феномен"ожерелье"+-7.Гемолиз-+8.Фагодиагностика+ (Гамма МВА, К-ВИЭВ)-9.МФА (на сибирскую язву)+-
. Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы и антракоидов (сибиреязвенноподобных)
В природе существует несколько видов микроорганизмов морфологически похожих на возбудителя сибирской язвы. Это непатогенные почвенные бациллы такие как Bac. anhtracoides, pseudoanthracoides, cereus, subtilis.
ПризнакиBacillus anthracisАнтракоиды1.Капсула+-2.Подвижность-+3.Гемолиз-+4.Рост на МПЖ"перевернутая елочка"разжижение"воронкой"5.Феномен "ожерелье"+-6.Фосфатазная активность-+7.Вирулентность мышей+-8.Фагодиагностика+ (Гамма МВА, К-ВИЭВ)-9.Серолог.диагностика (МФА, РДискП)+-10.ПЦР+-
. Биопрепараты для диагностики профилактики и лечения сибирской язвы
. Живая вакцина из безкапсульного эталонного штамма СТИ
. Живая вакцина из штамма 55
. Вакцина ГНКИ
. Ассоциированная живая жидкая вакцина против сибирской язвы и ЭМКАРа КРС
. Гипериммунная лечебно-профилактическая сыворотка и гамма-глобулин
Диагностические биопрепараты: преципитирующая сыворотка и стандартный АГ для РП, люминесцирующие сыворотки для МФА, диагностические бактериофаги.
. Патогенные анаэробы и болезни, вызываемые ими. Особенности взятия материала при анаэробных болезнях и проведения бакдиагностки (среды, условия)
Патогенные анаэробы относят преимущественно к клостридиям - это многочисленная группа почвенных, анаэробных, спорообразующих, палочковидных микроорганизмов, из них 12 патогенных: Сl.tetani - возбудитель столбняка (судороги); Cl.botulinum - возбудитель ботулизма (парезы и параличи гладкой мускулатуры); Cl.chauvoei - возбудитель ЭМКАРа (крепитирующие отеки в массивных группах мышц, хромотой, быстрой гибелью); Cl.perfringens, oedematiens, septicum, histolyticum, novyi, sordellii, sporogenes - возбудители злокачественного отека(отек и некроз травмированных тканей, лизис мышечной ткани с газообразованием, сепсис тканей, смерть); Cl.septicum, oedematiens, sordellii - возбудители брадзота овец (геморрагическое воспаление сычуга и 12-перстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально); Cl.perfringens тип C, D - возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии(геморрагический энтерит, кровоизлияния на слизистых, поражение почек, токсемия); Cl.perfringens тип B - возбудитель анаэробной дизентерии ягнят(общая токсемия, диарея, быстрая гибель, часто внезапная)
Кроме клостридий анаэробные инфекции вызывают микроорганизмы родов Fusubacterium necrophorum - возбудитель некробактериоза(гнойно-некротические поражения кожи, слизистой оболочки и конечностей); Bacteroides nodosus - возбудитель копытной гнили(мацерация и воспаление кожи межкопытной щели, гнойно-гнилостным распадом копытного рога).
Материал на ЭМКАР, брадзот, инфекционную энтеротоксемию и другие клостридиозы следует брать не позже 3-4 часов после гибели животного, так как затем происходит быстрое размножение анаэробов в организме. При ЭМКАРе не вскрывать трупы - почвенная инфекция. Среды Китта-Тароцци, молоко с кусочками печени, сахарно-кровяной агар Цейслера. Для выделения чистой культуры материал прогревают на водяной бане при 80С в течение 10-60 минут, чтобы в нем остались только споры клостридий. Создают анаэробные условия.
. Лабораторная диагностика столбняка. Характеристика возбудителя, биопрепараты для профилактики и лечения
Сем. Bacillacea, род Clostridium, возбудитель Clostridium tetani. Тонические и клонические судороги, что часто ведет к смерти.
В лабораторию: раневой экссудат (из глубины раны), кусочки тканей, гной.
Морфология: Гр+, Споры+,Капсула-,Подвижность+. Тонкие палочки до 6мкм, спора на конце
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение с незначительным газообразованием, запах жженого рога, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) нежный налет или колонии с приподнятым центром и периферическими отростками(паучки), вокруг колоний гемолиз
Биопроба: материал растирают в ступке с кварцевым песком+физраствор, смесь выдерживают при 20С, фильтруют, вводят белым мышам в/м. Наблюдают 5 суток, при наличии токсина наблюдают ригидность хвоста(вытянут вверх), спастический паралич задней лапки, тетанические судороги, гибель.
Серодиагностика: токсины дифференцируют реакцией нейтрализации токсина (РН). Сыворотку получают на биофабрике. Мыши опытной группы остаются живы и не заболевают. В лаборатории при обнаружении и идентификации столбнячного токсина диагноз считается установленным.
. Лабораторная диагностика ботулизма. Биопрепараты для профилактики и лечения
Сем. Bacillacea, род Clostridium, возбудитель Cl.botulinum - возбудитель ботулизма(кормовой токсикоз, парезы и параличи гладкой мускулатуры)
В лабораторию: пробы кормов, содержимое желудка, кусочки печени павших и кровь больных животных
Морфология: Гр+, Споры +, Капсула -, Подвижность +. Крупные палочки с закругленными концами, споры расположены терминально.
Рост: на Китта-Тароцци (МППБ) помутнение с незначительным газообразованием,запах прогорклого масла, на Цейслера (сахарный кровяной МПА) крупные колонии с корневидными отростками и зоной гемолиза или вуалеобразный налет с изрезанными краями.
Биопроба: экстракты фильтруют, делят на 2 части. Одну часть прогревают на водяной бане при 100С. Заражают морских свинок подкожно, мышей внутрибрюшинно или внутривенно. Зараженные некипяченым экстрактом погибают с западением брюшных мышц. Кипяченым - остаются здоровыми.
Серодиагностика: токсины дифференцируют реакцией нейтрализации токсина(РН). Сыворотку получают на биофабрике. Если тип токсина совпадает с антитоксической сывороткой, то мыши выживают, если нет - гибнут.
. Бактериологическая диагностика эмкара. Биопрепараты для профилактики и лечения
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.chauvoei - возбудитель ЭМКАРа (крепитирующие отеки в массивных группах мышц, хромотой, быстрой гибелью);
В лабораторию: не вскрывая труп, кусочки мышц, отечную жидкость
Морфология: Гр+, Споры+, Капсула-, Подвижность+. Полиморфные толстые палочки до 8 мкм
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение, осадок с незначительным газообразованием, запах прогорклого масла, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) колонии в виде перламутровой пуговицы, узкая зона гемолиза
Биопроба: центрифугатом заражают морских свинок внутримышечно, предварительно травмировав бедренную мышцу с внутренней стороны, наблюдают появление крепитирующих отеков в месте введения, интоксикацию и гибель.
Препараты: 1.Гидроокись алюминиевая формолвакцина против ЭМКАРа КРС и овец; 2.Ассоциированнная вакцина против ЭМКАРа и лептоспироза; 3.Ассоциированная вакцина против ЭМКАРа и сибирской язвы.
67. Характеристика возбудителя некробактериоза. Проведение лабораторной диагностики
Сем. Bacillacea, род Fusubacterium, Fusubacterium necrophorum - возбудитель некробактериоза (гнойно-некротические поражения кожи, слизистой оболочки и конечностей);
В лабораторию: соскобы тканей, трупы, паренхиматозные органы с некротическими очагами
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность-. Полиморфные кокки и палочки в виде цепе. Окрашиваются по Романовскому-Гимза.
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение с незначительным газообразованием,на Цейслера(сахарный кровяной МПА) мелкие росинчатые колонии.
Биопроба: кроликов подкожно в ухо - возникает некроз; белых мышей подкожно в области хвоста - нагноение, припухлость, абсцесс, отпадение хвоста.
Серодиагностика: РН не применяется.
. Характеристика возбудителей брадзота, энтеротоксимии, анаэробной дизентерии. Проведение лабдиагностики
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.septicum, oedematiens, sordellii - возбудители брадзота овец (геморрагическое воспаление сычуга и 12-перстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально); Cl.perfringens тип C, D - возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии(геморрагический энтерит, кровоизлияния на слизистых, поражение почек, токсемия); Cl.perfringens тип B - возбудитель анаэробной дизентерии ягнят(общая токсемия, диарея, быстрая гибель, часто внезапная)
В лабораторию: паренхиматозные органы, измененные участки стенки сычуга, 12-перстная кишка, мезентеральные лимфоузлы, отечная ткань; содержимое тонкого кишечника, кишечник, печень почки, селезенка.
Морфология: Гр+, Споры+, Капсула-, Подвижность+. Палочки с закругленными концами, в мазках-отпечатках нити; Гр+, Споры+, Капсула+, Подвижность-. Толстые короткие палочки расположенные палисадом или одиночно или попарно
Рост: на Китта-Тароцци (МППБ) интенсивное помутнение, умеренное газообразование, на Цейслера (сахарный кровяной МПА) сплошная нежная пленка с зоной гемолиза или корневидные колонии неправильной формы сероватого цвета с гемолизом или без;
На Вильсона-Блера с помутнением и газообразованием, на железосульфитном агаре черные колонии в глубине среды
Биопроба: лабораторных животных внутримышечно, в положительном случае гибель; лабораторных животных внутривенно или внутрибрюшинно, в положительном случае гибель.
Серодиагностика: РН не применяется; РН со специфическими сыворотками при обнаружении в исследуемом материале токсина
. Лабдиагностика при злокачественном отеке. Возбудители болезни и их характеристика морфологическая и культуральная
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.perfringens, oedematiens, septicum, histolyticum, novyi, sordellii, sporogenes - возбудители злокачественного отека (отек и некроз травмированных тканей, лизис мышечной ткани с газообразованием, сепсис тканей, смерть);
В лабораторию: кусочки пораженных органов, мышц, раневой экссудат
Морфология: Гр+, Споры+, Капсула-, Подвижность+. Палочки с закругленными концами, в мазках-отпечатках нити; Гр+, Споры+, Капсула+, Подвижность-. Толстые короткие палочки расположенные палисадом или одиночно или попарно
Рост: на Китта-Тароцци (МППБ) интенсивное помутнение, умеренное газообразование, на Цейслера (сахарный кровяной МПА) сплошная нежная пленка с зоной гемолиза или корневидные колонии неправильной формы сероватого цвета с гемолизом или без;
На Вильсона-Блера с помутнением и газообразованием, на железосульфитном агаре черные колонии в глубине среды
Биопроба: лабораторных животных внутримышечно, в положительном случае гибель; лабораторных животных внутривенно или внутрибрюшинно, в положительном случае гибель
Серодиагностика: РН не применяется; РН со специфическими сыворотками при обнаружении в исследуемом материале токсина.
. Характеристика возбудителя колибактериоза. Лабдиагностика болезни. Биопрепараты для лечения и профилактики
Семейство Enterobacteriaceae, род Escherichia, вид Escherichia coli, различные серовары(энтеротоксическая и энтеритная формы характеризуются диареей, обезвоживанием, интоксикацией, мастити, эндометриты, колисептицемия, отечная болезнь поросят, токсикоинфекции);
В лабораторию кал, сыворотка крови, трупы мелких животных, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, отрезок кишечника, головной мозг
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность+. Палочки, располагаются одиночно или попарно, факультативные анаэробы
Рост: на МПБ помутнение, легко разбивающийся осадок; на МПА сочные круглые колонии с ровными краями серо-белого цвета; на Эндо темно-малиновые колонии с мет.блеском; на Левина фиолетовые или черные колонии с мет.блеском; на Плоскирева скудный рост розовых колоний; на висмут-сульфит агаре не растет(или мелкие зеленоватые колонии); на 3хсахарном агаре Олькеницкого меняет цвет среды с розового на желтый.
Биохимические свойства Глюкоза+, Лактоза+, Маннит+, МПЖ-, H2S-, Индол+, Метиленовый красный+, на среде Симмонса с цитратом не растет (зеленая среда)
Биопроба: подкожно белых мышей, птиц интраокулярно
Серодиагностика: РА с инактивированным АГ, МФА
Препараты: диагностические: сыворотки люминисцентные для МФА, адгезивные коли-сыворотки, агглюцинирующие сыворотки; лечебные: поливалентная сыворотка против колибактериоза и сальмонеллеза, колипротектант ВИЭВ, антиадгезивные гипериммунные сыворотки, бактериофаг против колибактериоза и партифа, антибиотики; профилактические: вакцина для колострального иммунитета молодняка, поливалентная вакцина для пушных, ГОА вакцина, инактивированная формолвакцина для кур.
. Лабдиагностика сальмонеллезов. Основные серологические типы сальмонелл. Дифференциальная диагностика эшерихий от сальмонелл
Семейство Enterobacteriaceae, род Salmonella, вид Salmonella enterica, сероварианты: S.enteritidis, S.dublin, S, typhisuis, S.abortus equi, S.abortus ovis, S.gallinarum, S.pullorum(лихорадки, диарея, плевриты, артриты, аборты, пищевые инфекции)
В лабораторию кал, сыворотка крови, трупы мелких животных, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, отрезок кишечника, абортированный плод
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность+. Палочки, располагаются одиночно или попарно, факультативные анаэробы
Рост: культивирование в 3 этапа:
*на накопительных средах (Мюллера, Килиана)
*пересев на элективные и дифференциально-диагностические среды (Эндо, Левина, Плоскирева, ВСА)
*пересев на дифференциально-диагностические среды пестрого ряда для биохимического исследования.
МПБ-помутнение, осадок; МПА-колонии серо-белого цвета; Эндо (розовая)-колонии мелкие розовые; Левина(цвета гнилой вишни)-бесцветные колонии; Плоскирева (кипично-красная)-серо-желтые колонии;
ВСА-блестящие черные колонии на зеленой среде;
хсахарный агар Олькеницкого-скос красный, столбик желтый, черные пятна разрывы среды
Биохимические свойства Глюкоза+, Лактоза-, Маннит+, МПЖ-, H2S+, Индол-, Метиленовый красный+, на среде Симмонса с цитратом растет меняя её цвет с зеленого на синий
Биопроба: подкожно белых мышей
Серодиагностика: МФА, РА с живой культурой, РА с сывороткой крови
ПризнакиEscherichia coliSalmonella enterica1.Образование H2S-+2.Образование индола+-3.Расщепление лактозы+(изредка -)-4.Свертывание молока+-5.Колонии на Эндовишневые с мет.блескомсветло-розовые6.Колонии на Левинафиол. или черн. с мет.блеск.голубовато-сизые7.Колонии на Плоскиреварозовыесеро-желтые8.Висмут-сульфит агар(ВСА)не растет (или мелк.зеленов.колонии)черные9.Среда Симмонса с цитрат.не растетрастет, среда синеет10.Рост на 3-х сахарном агаре (Олькеницкого)желтый столбикрозовый скос, желтый столбик, черные пятна11.РАс инакт. АГ +с живым АГ +
72. Характеристика возбудителя паратуберкулеза и проведение лабдиагностки
Семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium, вид Mycobacterium paratuberculosis(расстройство деятельности ЖКТ, истощение, летальный исход);
В лабораторию кал, пораженные участки слизистой тонкого кишечника, комки слизи, брыжеечные лифоузлы
Морфология: Гр+, Споры-, Капсула-, Подвижность-. Палочки, располагаются в виде скоплений кучек, редко поодиночке, аэробы. Окрашивают по Цилю-Нильсену(красные на синем фоне)
Рост: на простых питательных средах НЕ РАСТЕТ! Посев на специальные среды с добавлением экстракта бактерийной массы микобактерий тимофеевой травы (Myc.phlei). Экстракт добавляют к средам Петраньяни, Гельберга, Левенштейна, а также используют специальную жидкую среду Данкина. На плотных - сначала изолированные колонии, затем складчатое наложение. На жидких - беловато-сероватая пленка, которая со временем увеличивается в объеме и опускается на дно.
Биопроба: лабораторные животные не восприимчивы
Серодиагностика: РСК, аллергический метод с паратуберкулином.
. Лабораторная диагностика туберкулеза. Характеристика видов возбудителя и их дифференциация
Семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium, вид Mycobacterium tuberculosis, M.bovis, M.avium (образование туберкул в органах и тканях, аэрогенное и алиментарное заражение);
В лабораторию молоко, моча, слизь, бронхиальные и средостенные лимфоузлы, плевра, отрезки кишечника
Морфология: Гр+, Споры-, Капсула-, Подвижность-. Палочки, располагаются в виде скоплений кучек, редко поодиночке, аэробы. Окрашивают по Цилю-Нильсену (красные на синем фоне). Кислото-спирто-щелочеустойчивые.
Рост: для культивирования патматериал измельчают, обрабатывают 607% р-ром серной кислоты, отмывают физраствором, делают мазки на питательные среды(метод Гона, Аликаевой), для жидкого материала - метод флотации с NaOH с ксилолом. Для выделения из патматериала среды Петраньяни, Гельберга, Левенштейна, для хранения - МППБ и глицериновый картофель. На жидких образуют пленку, на плотных - колонии цвета морской кости.
Метод Прайса: возбудитель образует микроколонии на стекле в жидкой кровяной среде, окрашивают по Цилю-Нильсену
Корд-фактор образуют только патогенные микобактерии - микроколонии в виде жгутов и кос.
Биохимические свойства: растет с салицилатом натрия, кислото-щелоче-устойчивость, сахаролитическая активность, синтез уреазы, синтез каталазы.
Биопроба: на лаб. животных
Серодиагностика: РСК, РГемА, РДиффузнойП, аллергический метод с туберкулином (вводят в толщу кожи, учитывают по утолщению кожной складки за счет отека при положительной реации)
Дифференциация видов: человеческий тип-15-20 дней рост, у морских свинок генерализация, у кроликов очаговая форма, у птиц-непатогенен; бычий тип 25-35 дней рост, у морских свинок и птиц как у человеческого, у кроликов генерализация; птичий тип растет 1-2 месяца, для морских свинок непатогенен, у кроликов сепсис, у птиц генерализация.
74. Бакдиагностика бруцеллеза. Характеристика возбудителя
Род Brucella, виды Вr.melitensis, Br.abortus, Br.suis, Br.ovis, Br.canis(задержание последа, метриты, бурситы (суставы), полиневриты, радикулиты(нервная система));
В лабораторию молоко, абортированные плоды, лимфоузлы, матка, яичники, вымя, семенники
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность-. Мелкие кокковидные палочки, располагаются одиночно, парами, небольшими группами
Рост: среды глюкозные, глицериновые - МППБ, МППГГБ, МППГГА, ПГГА, ПГГБ, эритрит агар
На жидких - равномерное помутнение, пристеночное кольцо, незначительный осадок. На плотных - росинчатые мелкие выпуклые колонии S-формы
Биохимические свойства: молоко не свертывают, желатин не разжижают, образуют каталазу.
Биопроба: заражают подкожно морских свинок, контроль - РА
Серодиагностика: РА, РСК, РБП, КР с молоком, МФА.
. Культуральные свойства бруцелл и методы дифференциации видов бруцелл. Биопрепараты для диагностики и профилактики
На жидких - равномерное помутнение, пристеночное кольцо, незначительный осадок. На плотных - росинчатые мелкие выпуклые колонии S-формы
Для дифференциации используют тесты:
* Br.abortus и Br.ovis микроаэрофилы, остальные - аэробы
* Br.suis, Br.abortus образуют H2S
* виды бруцелл различаются по способности проявлять оксидазную активность, расти в среде, содержащей тионин, основной фуксин
Биопрепараты:
Для диагностики: бруцеллезный АГ, моноспецифическая сыворотка люминисцентная сыворотка
Для профилактики: живая вакцина, вакцина слабоагглютиногенного штамма, инактивированная адъювант-вакцина.
. Аллергическая и серодиагностика бруцеллеза у животных
Аллергический метод: вводят бруцеллин ВИЭВ для аллергической диагности бруцеллеза овец, коз, свиней.
Серодиагностика:
) РА с позитивной моноспецифической сывороткой для идентификации полученной культуры
) РА с единым бруцеллезным АГ, для исследования сыворотки крови животных
) РСК
) РБП(розбенгалпроба)
) КР с молоком
) МФА для экспресс диагностики.
. Характеристика лептоспир. Проведение лабдиагностики при лептоспирозе. Специфическая профилактика
Род Leptospira, вид Leptospira interrogans, серогруппы Pomona, Tarassovi, Hebdomadis, Grippotyphosa, Icterohaemorrhagiae(лихорадки, анемии, желтухи, гемоглобинурии, геморрагический диатез, некроз слизистых, атония органов пищеварения, аборты);
В лабораторию молоко, моча, слизь, бронхиальные и средостенные лимфоузлы, плевра, отрезки кишечника
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность+- за счет сокращения фибрилл осевой нити тела. Спиралевидные бактерии с множеством мелких завитков. Окрашиваются по Романовскому-Гимзе-розовые, по методу Левадити после импрегнации серебром в срезах органом. Факультативные анаэробы.
Рост: посев на водно-сыворточные среды (Уленгута, Любашенко, Терских) - рост определяют микроскопией, плотные(Кокса, ВГНКИ) - колонии различные в основном S-формы.
Биохимические свойства: Каталаза+, Оксидаза+, Липаза+, ферментация углеводов не доказана.
Серодиагностика: РМА (в лунках агглютинационных планшет), РА на пластинке, МФА
Биопроба: золотистых хомячков и крольчат-сосунов. Убивают, проводят посевы.
Специфическая профилактика: депонированная поливалентная сыворотка, инактивированные вакцины Нобивак, Биокан для собак.
Для терапии: иммунная сыворотка против лептоспироза из крови волов-продуцентов.
. Характеристика возбудителей кампилобактериоза (вибриоза). Лабдиагностика болезни
Род Campylobacter, вид Campylobacter fetus veneralis или fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli (генитальный - вагиниты, эндометриты, аборты, бесплодие; кишечный - энтериты, кишечные инфекции у людей)
В лабораторию абортированные плоды, часть плаценты, влагалищную слизь, сперму, препуциальные смывы, фекалии, ректальные мазки
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность+ . Микроаэрофилы, вибрионы. Окрашивают водным раствором фуксина
Рост: ПЖА на печеночной и сердечной воде, эритрит-агар. На ПЖА в виде серо-голубоватого диска или кольца чуть ниже поверхности среды. Со временем образует пленку. На плотных - бесцветные колонии.
Для получения чистой культуры посев на СЖН (сафранино-железоновобиомициновую среду розового цвета), мембранные фильтры, метод пастеровских пипеток, в стеклянной трубке в пробирке
Серодиагностика: РА, МФА, РА с влагалищной слизью
Биопроба: морских свинок, хомячков, кроликов, куриные яйца для восстановления свойств кампилобактерии.
. Характеристика возбудителей и лабдиагностика стригущего лишая и парши. Спецпрофилактика стригущего лишая
Трихофития - стригущий лишай - заразная болезнь, которая характеризуется появлением на коже резко ограничеснных безволосых очагов с шелушащейся чешуйчатой поверхностью или с выраженной воспалительной реакцией кожи и фолликулов. Возбудитель - несовершенный гриб рода Trichophyton. Споры распологаются продольными цепочками внутри волоса или снаружи. Микроскопируют: материал на предметном стекле+капля гидроксида натрия или калия+греть до паров+глицерин+покровное стекло. Культивируют на глюкозном агаре, среде Сабуро, среде Чапека, сусло-агаре - колонии в виде пушистого налета.
Спецпрофилактика: вакцины вводят в область крупа для формировании длительного иммунитета, больных же лечат однохлористым йодом, фенотиазином
Фавусное поражение - парша - инфекционная болезнь, которая характеризуется поражением кожного покрова в виде белых плотных налетов (фавусных щитков), состоящих из мицелия и спор гриба Favus. Элементы гриба находятся внутри волоса, обнаруживаются пузырьки воздуха различной величины. Щитки при микроскопии состоят из массы спор различной величины и формы, извитых нитей мицелия. Культивируют на агаре Сабуро - бархатистые колонии. Лечение - креолиновая мазь для размягчения, обработка раствором перманганата калия или салицилового спирта до выздоровления.
. Лабдиагностика сапа, характеристика возбудителя и дифференциация от сапоподобных (эпизоотический и язвенный лимфангинит, мелиоидоз)
Семейство Pseudomonadaceae, род Burkholderia, B. mallei(образование сапных узелков во внутренних органах, на слизистых и кожных покровах, при разрыве которых образуются язвы)
В лабораторию пораженные органы, лимфоузлы, содержимое язв
Морфология: Гр-, Споры-, Капсула-, Подвижность-. Аэробы, полиморфные палочки, прямые или слегка изогнутые
Рост: среды с глицерином МПА, МПБ, глицериновый картофель. На жидких - равномерное помутнение среды, пристеночное кольцо, пленка. На плотных - налет.
Биохимические свойства: расщепляют углеводы, Индол-, МПЖ разжижают.
Серодиагностика: РСК, аллергическая диагностика - маллеинизация:маллеин - аллерген на сап закапывают под нижнее веко - положительная реакция в виде воспаления конъюктивы и истечения гнойного секрета.
Биопроба: самцов золотистых хомячков или самца морской свинки подкожно - орхит(воспаление яичек)
Патогенез мелиоидоза - Pseudomonas pseudo-mallei Возбудитель болезни, проникнув в кровь через кожные покровы, органы дыхания или желудочно-кишечный тракт, заносится и локализуется во внутренних органах, где происходит его размножение. Микробы выделяют токсины, которые повреждают клетки и вызывают их некроз. В пораженных органах возникают мелкие некротические очажки, которые в дальнейшем подвергаются казеозному распаду, а также абсцессы в регионарных лимфатических узлах и мышцах. На коже и слизистых оболочках образуются мелкие узелки и гноящиеся язвы; развивается септикопиемия, и животное погибает.
Патогенез лимфангоита - хронический микоз Возбудитель проникает в организм через мелкие дефекты кожи (ссадины, натертые места, надрезы, раны) обычно в области холки, спины, головы, конечностей, где размножается и вызывает местное воспаление в форме гнойных узелков величиной от просяного зерна до горошины. При этом криптококки фагоцитируются макрофагами.
Дифференцируют путем проведения бактериологических, серологических и аллергических (маллеинизация) исследований.
. Риккетсии и хламидии. Характеристика возбудителей и заболевания, вызываемые ими
Рикеттисии - Семейство Rickettsiaceae, род Rickettsia (ученый Х.Т.Риккетс)- мелкие внутриклеточные бактерии, вызывают-риккетсиозы. (Ку-лихорадка - Coxiella burneti, инф. Гидроперикардит-Cowdria ruminantum, риккетсиозный моноцитоз собак - ehrlichia canis и кератоконъюнктивит)
Характеристика возбудителей:
*короткие, с закругленными концами , палочки 0,2-1,0 мкм. ( клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана высоко проницаема- это обуславливает их паразитический образ жизни , рибосома, ядерный аппарат, синтезируют белок ,ДНК, РНК, АТФ, ферменты промежуточного обмена.)
*располагаются одиночно/попарно, спор не образуют, неподвижны, Гр-, размножаются - поперечное деление.
*на простых средах не растут! Используют куриные эмбрионы /культуры клеток животных.
*чувствительны с Т и хим.факторам.
Характеристика болезней:
*паразитирование возбудителя на разных видах сельскохозяйственных и диких животных, грызунах, птицах и кровососущих насекомых (членистоногих);
*у кровососущих членистоногих патогенные риккетсии могут вызывать или смертельную инфекцию, или бессимптомное заболевание, в частности инфекцию с трансовариальной передачей возбудителя (риккетсиоз типа пятнистой лихорадки Скалистых гор и цуцугамуши). В последнем случае зараженные членистоногие становятся резервуаром риккетсии;
*среди диких животных в естественных условиях риккетсиозы чаще всего встречаются у грызунов (крысиный сыпной тиф и лихорадка цуцугамуши у грызунов);
*риккетсиозы у домашних животных сопровождаются признаками интоксикации и лихорадки, протекают в виде бессимптомных инфекций (Ку-риккетсиоз) или в виде тяжелых, часто смертельных заболеваний (сердечная водянка рогатого скота);
*эпидемиология и эпизоотология риккетсиозов в основном характеризуются их распространением среди людей и животных кровососущими членистоногими;
*у человека патогенные риккетсии вызывают различной тяжести лихорадочные заболевания, обычно с характерными высыпаниями на коже (сыпнотифозные и пятнистые лихорадки) и поражениями кровеносных сосудов.
Например ку-лихорадка: зоонозный риккетсиоз КРС, МРС и человек. Переносчик клещ рода дермацентор. Человек заражается через молоко. Протекает с лихорадкой. После убоя риккетсии обнаруживаются в почках и селезенке.
Диагностируют-на осн биопробы: кровь берут во время лихорадки, заражают морскую свинку внутрибрюшинно.в момент наивысшего подъема температуры свинку убивают,в мазках их печеночной или селезеночной ткани обнаруживают риккетсии.
Хламидии - Семейство Chlamydiaceae, род Chlamydia
Внутриклеточный паразит, возб-ь инф болезней животных и человека. Не производят АТФ (зависят от энергии кл,)подавляют синтез клеточной ДНК, переключают на синтез ДНК И ПРОТЕИН хламидии.
Хламидии устойчивы во внеш.ср, выделяясь с какашкамиостаюсь живи несколько месяцев( 2%хлорамин 3%лизол 5% naoh разрушают хламидии в теч 3 часов. 70 Т в теч 15мин
Культивируют:на куриных эмбрионах, белых мышах, в культуре кл.
В пораженных кл:
*инф-е элементарные частицы - образуются в конце внутриклеточного цикла развития и содержат рнк и днк (округлые, диаметром 250-350нм), зрелые окрашиваются акридином в желто-зелены/зеленый, незрелые ярко-красные.
В начале инф в цитоплазме формируется матрикс, затем появляются крупные элементарные частицы без нуклеотида и оболочки. они не устойчивы во внеш. ср, чувствительны к антибиотикам, не обладают инфекционностью.
В конце инф появляются мелкие элементарные частицы они имеют днк-содержащий нуклеотид и плотную 3хслойную оболочку, устойчивы во внеш. ср, не чувствительны к антибиотикам.
*цитоплазматические включения (окрашиваются по романовскому: красно-фиолетовые-незрелые, сине-фиолетовые-зрелые)
*есть видовые и групповые антигены.
Заболевания: орнитоз птиц, крс: аборты. вульвовагинит, орхит, энцефалит, свиней: бронхопневмонии, перикардит
Возбудитель орнитоза Chlamydia ornithosis округлой формы, располагается внутриклеточно, а в мазках отпечатках в виде скоплений, окруженных оболочкой
Крс, мрс, человек, голуби, попугаи цыплята. протекает септически, поражая внутренние органы. Носители-домашние и дикие птицы. Человек заражается арогенным путем.
Диагностика: мазков из печени, селезенки, легкого, экссудата. Биопроба (внутрибрюшинное заражение лабораторных животных) и рск.
. Микоплазмы и их характеристика. Болезни, вызываемые микоплазмами
Мельчайшие свободноживущие прокариоты без ригидной кл.стенки.вместо нее 3хслойная цитоплазматическая мембрана.осн компоненты мембраны стерины(группа биохимически важных веществ из группы стероидов). Рибосомы и нуклеотид.не синтезируют пептидогликан.. полиморфизм- от мелких сферических до нитевидных. Гр -
Мycoplasma mycoides-перипневмония КРС, Agalactiae-инф агалактия, Mycoides subsp. Capri - инф плевропневмония коз, Gallisepticum-респираторный микоплазмоз птиц
Например: agalactiae
Характеризуется поражением молочной железы, отсут секреции молока, поражение глаз, суставов. При остром гибнут через 5-8 дней.
Пат. материал: молоко, синовиальная жидкость, печень, селезенка, почку, лимфоузлы, часть вымени.
Микроскопия: на стенко, растирают, сушат 24ч, в дист воду на 10 мин, высушивают, фиксируют, красят по р-гимза, моют, сушат.
Биопроба: подкожно и интрацистернальным заражением овец и коз. инкубационный период 2-14дней.
83. Микозы, дерматомикозы, микотоксикозы. Характеристика возбудителей
Микозы - группа специфических болезней, вызываемых микроскопическими грибами (дрожжеподобными), активно паразитирующими в животном организме.
Кандидомикоз (Candidamycosis, кандидоз, молочница)- заразная б. животных и человека, харак-я поражением слизистых ЖКТ и других органов с образованием творожистых наложений, и гранулематозных образований во внутренних органах, кожи. Candida albicans, stellatoidea, tropicalis и др.
Морфология: микроскопия в живом состоянии в препарате раздавленная капля, окраска по Романовскому-Гимзе, Гр+, неподвижные, имеется двухконтурная оболочка, кандиды не образуют аски, формируют псевдомицелий состоящий из цепочек удлиненных дрожжевых клеток.
Культивирование: Аэробы, растут на плотных и жидких средах. На сусло-агаре формируются колонии, крепко вросшие в субстрат. На жидких средах рост глубинный - помутнение, осадок, пленки, пристеночное кольцо. Сухая селективная среда кандида-агар, на ней колонии выпуклые конусовидные вначале гладкие, потом шероховатые. Окраска колоний от темно-синей до пурпурной.
Биохимические свойства: Глюкоза+, Лактоза+, Раффиноза+, лакмусовое молоко+, Левулеза+, продуцируют токсины - кандидатоксин и кликопротсин, грибы устойчивы к высушиванию, однократному замораживанию.
Биопроба на вирулентность: заражают лабораторных животных - развитие острого или хронического заболевания
Диагностика: микроскопией - обнаруживают мицелий, псевдомицелий, бластоспоры
Кокцидиомикоз - контагиозное, характеризуется гранулематозным поражением органов дыхания и региональных лимфоузлов. Восприимчивы: собаки,свиньи,овцы,кошки,крс.заражаются аэрогенным через пыль.
Эпизоотический лимфангоит - африканский сап ,бластомикоз, -хроническая заразная б. цельнокопытных животных, хар-я воспалением лимфатических сосудов кожи и подкожной клетчатки с обр-ем гнойных очагов. микробиология плесень микрофлора антибиотик
Дерматомикозы - микозы, сопровождающиеся поражением кожи и ее прозводных.
Трихофития Трихофития - стригущий лишай - заразная болезнь, которая характеризуется появлением на коже резко ограничеснных безволосых очагов с шелушащейся чешуйчатой поверхностью или с выраженной воспалительной реакцией кожи и фолликулов. Возбудитель - несовершенный гриб рода Trichophyton. Споры распологаются продольными цепочками внутри волоса или снаружи. Микроскопируют: материал на предметном стекле+капля гидроксида натрия или калия+греть до паров+глицерин+покровное стекло. Культивируют на глюкозном агаре, среде Сабуро, среде Чапека, сусло-агаре - колонии в виде пушистого налета.
Спецпрофилактика: вакцины вводят в область крупа для формировании длительного иммунитета, больных же лечат однохлористым йодом, фенотиазином
Микроспория - стригущий лишай - заразная болезнь кожи и волос, клинически проявляющийся образованием очагов поверхностного воспаления кожи, обламыванием волос и поражением ногтей. Возбудитель - несовершенный гриб рода Microsporium. При этом волосы окутаны чехлом из мелких спор, расположенных мозаично. При надавливании на покровное стекло чехол распадается на отдельные кучки спор. Внутри волоса также обнаруживаются скопления спор. В соскобе: m.lanosum (собак и кошек) - на сусле-агаре через 2-3 сут после посева появляются круглые с концентричекими кругами серовато-белые колони. с возрастом становятся мучнистые. обратная сторона желтая. m.equinum (у лошадей) на среде сабуро кожистые, складчатые колонии, покрытые серобелым мицелием.цвет зрелых- желтые/коричневые, на обратной стороне желтые. Лечение: вакцина ментовак.мази.
Фавусное поражение - парша - инфекционная болезнь, которая характеризуется поражением кожного покрова в виде белых плотных налетов (фавусных щитков), состоящих из мицелия и спор гриба Favus. Элементы гриба находятся внутри волоса, обнаруживаются пузырьки воздуха различной величины. Щитки при микроскопии состоят из массы спор различной величины и формы, извитых нитей мицелия. Культивируют на агаре Сабуро - бархатистые колонии. Лечение - креолиновая мазь для размягчения, обработка раствором перманганата калия или салицилового спирта до выздоровления.
Микотоксикозы - заболевания, возникающие у с/х животных после поедания кормов, загрязненных токсинами от грибов. Две группы микотоксикозов: отправление токсинами грибов паразитирующих на вегетирующих растениях, и отправления токсинами грибов-сапрофитов, поражающих корма во время хранения.
Аспергиллотоксикозы (Aspergillotoxicosis) - алиментарные микотоксикозы с/х, возникающие при скармливании кормов, пораженных аспергиллами (Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus) - для исследования в лабораторию отправляют паренхиматозные органы погибших животных, соскобы с некротических участков, а также пробы подозрительных кормов. Проводят микроскопию и микологическое исследование кормов, а также проверку их токсичности в лаборатории. Специфические средства лечения и профилактики отсутствуют.
Фузариотоксикозы (Fusariotoxicoses) - алиментарные микотоксикозы, вызываемые грибами рода Fusarium, содержащимися в кормах. Мицелий септированный, красного, белого или розового цвета. Фузарии выращивают на среде Чапека - пышные желтоватые колонии которые пересевают на сусло-агар с целью получения чистой культуры. Препараты для лечения и профилактики не разработаны.
Стахиботриотоксикоз (Stachybotryotoxiecosis) - остро, реже подостропротекающий микотоксикоз, возникающий при поедании кормов, пораженных токсическим грибом Stacybotris alternans, который относится к несовершенным грибам. Мицелий септирован, многоклеточный, от мицелия отходят гифы, конидиеносцы со стеригмами и находящимися на них конидиями. Гриб растет на влажных растительных кормах, богатых целлюлозой и в почве. На естественных субстратах образует черный налет. Культивируют на среде Чапека, Сабуро, сусло-агаре. На жидких средах поверхностный рост в виде пристеночного кольца и пленки. На плотных двухзонные колонии. Среда прокрашивается в черно-коричневый цвет.